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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
150
- 供应商:
上海雅吉
- 检测范围:
预期的 PCR 产物长度为 494 bp
- 检测方法:
PCR法
- 应用:
电泳检测 PCR 产物
- 适应物种:
见说明书
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清细胞动植物组织
- 规格:
50次
关样本的采集、运输以及核酸的提取纯化。能快速灭活病毒和酶的活性,保护病
毒的核酸在常温下 4 天不降解,能从拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道
拭子等)中提取微量病毒 DNA 和 RNA。它具有如下特点:
1. 一站式,含有样品采集运输所需要的拭子、保存液和保存管,可用于病
毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 双提取。
2. 含病毒快速灭活试剂,可以在数分钟之内灭活各种 DNA 病毒和 RNA
病毒,使之失去传染性。
3. 含有高效酶灭活试剂,可以快速灭活包括 DNase 和 RNase 在内的各
种酶,去除降解核酸的隐患。本产品保存液中的病毒已经灭活,不能用于病毒培
养。
4. 含有特殊的核酸保护剂和稳定剂,可以使释放出来的病毒 DNA 和病毒
RNA 在常温下 4 天内无明显的降解。
5. 可用于各种拭子的采集保存和运输,包括口腔拭子、咽喉拭子、鼻腔拭
子、阴道拭子等等。
6. 保存的样品可以在常温运输(4 天之内),如果超过 4 天需要-20℃保
存和运输。
7. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
8. 与 PCR 和其他核酸扩增兼容,所得核酸可用于 PCR 等后续扩增实验。
9. 本产品只能用于科研。
注意:尽管本试剂盒的保存液含有病毒灭活剂,但不能排除离心管外在取样时污
染了病毒,因此操作人员必须按处理传染性样品的方法进行相应的防护,必须在
合乎国家规定的实验室进行所有操作。
一、病毒采集、运输和保存
1. 采样前,在采样管(2mL 红盖管)的标签上标注相关样品信息。
2. 根据不同的采样要求,用采样拭子在相应的部位和器官采样。具体采样方法
如下:
a) 鼻拭子:将拭子头轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
b) 咽拭子:用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁后退出。
c) 尿道采样:对男性,用拭子插入尿道约 2cm 处旋转,静止数秒后退出。对
女性,抹去宫颈口粘液,用拭子插入宫颈管 1-2cm 处后退出。
d) 其他拭子采样:本手册暂不详述。
3. 迅速将拭子放入本采样管中(含 0.6 mL 病毒保存液),将拭子在样品管中
旋转 15 秒。
4. 将采样拭子在折断处折断,丢弃把柄端,旋紧管盖。
5. 新鲜采集的标本应在 4℃-25℃下 96 小时(4 天)内运送至实验室,未能 96
小时送至实验室的,应置于-70℃或以下保存,DNA 样品也可以放-20℃保
存。
二、病毒核酸提取纯化
注意:由于病毒有传染性,因此实验过程中的所有垃圾需要按有传染性物质处理。
操作人员也必须相应做好防护
6. 如果离心管中的 0.6 mL 病毒保存液在低温下凝固,则需要先在 37-65℃融
化。
7. 在融化的病毒保存液中加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中,盖上盖子后颠
倒混匀,转移一半的混合液(0.7mL)到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
8. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到
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文献和实验等[9]利用免疫胶体金试验,采取病死鸽棉拭子样品30 min内即完成对一发病鸽群的快速鉴别诊断,排除禽流感病原,通过进一步的鉴定,结果该鸽群患的是禽Ⅰ型副黏病毒病。王长美等[10]用免疫胶体金试验诊断一发病率高、死亡快、疑似禽Ⅰ型副黏病毒感染的鹅病例,结果为禽流感阴性,根据临床症状和病变情况、免疫胶体金试验以及病毒分离和鉴定,证明该鹅群患禽Ⅰ型副黏病毒病,实现了对禽Ⅰ型副黏病毒病的快速鉴别诊断。王爱华等[11]选择15 nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(Egg drop syndrome
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