德国美天旎Miltenyi细胞分选磁珠CD4+CD25+CD

名称：CD4+ CD25+ CD127dim/– Regulatory T Cell Isolation Kit II, human
货号 : 130-094-775
厂家：德国美天旎
类别：人类T细胞及亚群磁珠分选试剂（T cells and T cell subsets,human）

产品介绍： MACS® 分离原理 CD4+ CD25+ CD127dim/– 调节性 T 细胞的分离分两步进行。首先，使用生物素缀合抗体混合物（作为初级标记试剂）和与微珠缀合的抗生物素单克隆抗体（作为次级标记试剂）间接磁性标记非 CD4+ 和 CD127high 细胞。在两个标记步骤之间和之后不需要清洗步骤。随后，通过 MACS® 柱进行分离，将标记的细胞耗尽，该柱放置在 MACS 分离器的磁场中。第二步，CD4+ CD25+ CD127dim/– 调节性 T 细胞直接用 CD25 MicroBeads II 标记，并通过置于 MACS 分离器磁场中的 MACS 柱进行分离，从预富集的 CD4+ T 细胞级分中进行正选分离。从磁场中取出柱子后，磁性保留的 CD4+ CD25+ CD127dim/– 调节性 T 细胞可以作为 po 被洗脱。 
 背景信息： 调节性 CD4+ T 细胞是抑制细胞，通过各种机制中和其他免疫细胞。 1 其特征标记是转录因子 FoxP3。 CD4+ CD25+ 调节性 T 细胞最初在小鼠中发现，但在人类中也发现了具有相同表型的群体。²– ⁶ CD25 是白细胞介素 2 受体 α 链，不仅由调节性 T 细胞表达，还由激活的效应 T 细胞表达。 CD127（IL-7 受体的 α 链）在大多数成熟 T 细胞上表达，并在其增殖和分化中发挥重要作用。 7 然而，在调节性 T 细胞上不存在 CD127，其表达与 FoxP3 表达呈负相关。⁸,⁹ 因此，CD127 可用作区分人类调节性 T 细胞和活化 T 细胞的附加标记。
有关磁珠的知识
MACS磁珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。磁珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。磁珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。此外，MACS磁珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。

MACS磁珠主要有三种：直标磁珠、间标磁珠、多选磁珠。其中间标磁珠有抗免疫球蛋白磁珠、抗生物素磁珠或链霉亲和素磁珠、抗荧光素磁珠。多选磁珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种磁珠。这种磁珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选磁珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。