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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
KLH conjugated synthetic peptide derived from human
- 亚型:
IgG
- 形态:
冻干粉
- 保存条件:
Store at -20℃ for one year.
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
无标记物
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 Flow-Cyt=1μg/Test ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
详见说明
- 抗体英文名:
INPP5F
- 抗体名:
磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗体
- 规格:
50ul-100ul
产品描述:Lyophilized or Liquid。Suppresses apoptosis in a variety of cell systems including factor-dependent lymphohematopoietic and neural cells. Regulates cell death by controlling the mitochondrial membrane permeability. Appears to function in a feedback loop system with caspases. Inhibits caspase activity either by preventing the release of cytochrome c from the mitochondria and/or by binding to the apoptosis-activating factor。
文献引用格式:Streptavidin/HRP (QiMing Biological Technology, Shanghai, China. Catalog #PB123)
应用范围:WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 Flow-Cyt=3ug/test IF=1:100-500
抗体来源:Rabbit
免疫原:Recombinant protein
抗体规格:50μl;100μl
不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。
一个良好的抗原必须具备的条件:
① 分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位,因此分子太小的多肽或蛋白是很难有一个表位的。
② 外源性强。在个体形成的早期就对自身物质形成了免疫耐受,因此如果和机体内的物质完全一样或者是相似就很难引起机体的免疫应答。如果是利用免疫赦免区的成份(如大脑、眼球、睾丸内部成份)则不必考虑外源性。
③ 结构尽量复杂。简单重复的物质是不具有免疫原性的,拿明胶来说,它的分子量非常大,而且外源性也很强,但是组成明胶的氨基酸多为直链氨基酸,在体内容易被降解,因此它的免疫原性很弱。类似地,淀粉、核酸、多聚 Lys 的免疫原性也很弱。
④ 可降解性好。作为抗原,必须是可以降解的,塑料、不锈钢等难降解的物质免疫原也很弱。由D-型氨基酸组成的物质免疫原性也很弱,同样是因为机体不能降解 D-氨基酸组成的蛋白或多肽。
包涵体的处理没有问题,可以高压破碎,也可以超声破碎。我们的建议是,第一次做,要做一个梯度洗杂,就是2M, 4M,8M尿素洗杂,如果低浓度的尿素不造成目的蛋白的溶开。可以多次洗杂。而复性的情况缓冲液的选择,要避开等电点,但疏水集聚是复性的大敌,因此要用triton x 100等去垢剂,或者5%的甘油来改善疏水集聚造成的沉淀。使用透析方法复性,要注意蛋白的沉淀,这个不如稀释法来的好,来的方便。复性上清,完全可以上柱纯化,这个没有问题。 pH的选择。其实可以选定不同的pH, 比如pH5.5的醋酸钠,pH 6.5 的磷酸钠,pH8.5-9.0左右的tris, 这些条件要摸索。 对于含有二硫键的蛋白,要考虑氧化还原氛围,通常用GSH GSSG(5 mM)来控制氧化还原条件, 但要注意GSH会造成镍柱的变色,影响结合。精氨酸(100 mM左右)是常用的复性添加成分,可以保护大部分包涵体复性过程。
为了提供最优质的抗体,圻明生物对每一批INPP5F磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗体都用没有转染过的细胞系和体细胞组织检测,以保证INPP5F磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗体有足够的亲和性足以和对应蛋白天然的表达含量起反应。
应用 稀释度*
Immunohistochemistry in paraffin section 1:50-400
Immunohistochemistry in frozen section 1:100-500
Immunocytochemistry in fixed cells 1:100-500
Western blotting 1:100-1000INPP5F磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗体
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文献和实验的,因为 GPI 锚定蛋白可以通过磷酸肌醇特异性磷脂酶 C 被释放。事实上,这种脂肪酶被用于检测 GPI 锚定蛋白,以从膜中释放 GPI 锚定蛋白,从而进行凝胶分离和质谱分析。②、N-肉豆蔻酰化是一种为蛋白膜定位提供疏水手柄的方法。肉豆蔻酰基是一种 14 碳的饱和脂肪酸 (C14),它使蛋白质具有足够的疏水性和对膜的亲和力,但不足以将蛋白质永久锚定在膜上。因此,N-肉豆蔻酰化可以作为一个构象定位开关,在此过程中,蛋白质构象变化影响蛋白质的可用性,用于膜连接的手柄。由于这种条件性定位,选择性定位在膜上的信号
步聚,并将信号转导进入细胞核内,触发在遗传上预先确定的若干个途径中的某一个或几个途径,并诱导T细胞的增殖和分化,从而发挥其效应功能。 目前认为T细胞的活化途径除经典的磷脂酰肌醇(phosphatidylimositol)代谢途径之外,还包括蛋白酪酸激酶途径以及T细胞活化旁路途径。磷脂酰肌醇代谢途径可在T细胞及其它多种细胞类型中发挥作用,通过磷脂酰4,5-二磷酸肌醇(PIP2)的水解以及1,4,5-三磷酸股醇(IP3)和1,2-二酰基甘油(diacylglycerol,DAG)第二
吸附,此外你目标蛋白会不会降解,这样有小分子还一样被吸附,你可以通过抗体做WB看看,如果是这样,那只能在纯化过程中加一些酶的抑制剂来避免。 我能想到的就是这两种情况了。 我是用的硼氢化钠和氢氧化钠活化的,然后加入偶联剂过夜,最后加入配基,采用pH7.5的5mM磷酸氢二钠缓冲液平衡,洗脱是等PH条件下进行的,只不过改变了洗脱剂的浓度,从最大浓度洗脱的结果看,往往就少了其中一条带,你的解释我会认真思考的,亲和中存在离子吸附,是不是目标蛋白和杂蛋白的等电点很接近造成的?平衡液中加点盐,主要
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