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- 2025年07月14日
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上海一基
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文献和实验【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
xungufeng820 各位大侠： 小弟是新手，师兄们也没做过的，不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗？急盼回复！万分感谢！ snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白，之后western-blot检测NF-KB，但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀，需要比较大的上样量才能检测出来，个人感觉，还是用传统的细胞匀浆裂解，离心提取上清，这样得到的蛋白浓度大，做试验结果好
市面上的 ELISA 试剂盒五花八门，质量良莠不齐。如何浪里淘金，选择既符合科研需求，又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢? 教你七招，快速搞定 ELISA 试剂盒的选择！ 01 查找待测样本的蛋白浓度 通过检索 SCI 文献、Genecards、Mayocliniclabs 等，获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值，比较 ELISA 试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。 02 明确试剂盒的应用种属＆检测的样本类型 不同厂家验证的样本类型不同。除试剂盒特别说明外，一般情况下，不同
：高脂实验样本该如何处理？ A1：高脂实验样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样，会影响抗原抗体的结合，导致测值不准确。建议先大转速（5000×g）离心，静置 10min 后，取中层较澄清液体，再用大转速（≥5000×g）离心一次，取中下层清液，用于检测。 Q2：实验样本稀释方案是怎样的？ A2：试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前，建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度，并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释，参考稀释方案如下： 稀释 100
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