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100
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上海一基
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科研
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盒
本公司长期经营"试剂盒、细胞、酶、血清、抗体、标准品生物试剂、标准品、仪器、耗材、培养基等生物化学试剂。价格实惠,质量有保证。客户可以通过电话、传真、E-mail、网络订购!
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合作单位:
上海华东理工大学、北京医科大学、西南科技大学、江西理工大学、贵州师范大学、北京林业等 。
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文献和实验Western blotting using ECL reagent
diluted 1:8000 in TBS-T + 1.5% gelatin for 1 hour.6. Repeat step # 4 (wash)7. Prepare ECL solution for detection: mix equal volume of ECL reagent 1 and 2, (1:1) with final volume regarding of 0.125 ml/cm2 (for a mini gel- 4 ml of each reagent).8. Remove
temp for 1 hour. (Can be left at 4℃O/N here)►Wash briefly 2X then 3X10 min each with TBS-T►Mix an equal volume of detection reagent 1 with detection reagent 2 (usually 2mLs total is sufficient).►Drain excess TBS-T from membrane. Lay membrane on a piece
入适量的一抗,置于 4℃ 冰箱中过夜。洗膜:将过夜杂交的膜从塑料袋中取出,投入含有足量体积 TBST 的洗膜盒中,于摇床上清洗,每次 10 分钟,连续 3 次。二抗杂交:处理步骤类似一抗杂交步骤,不同之处在于二抗杂交可在常温下,1 小时内完成。二抗比例控制在 1:2000~1:5000。洗膜:见步骤 7。显影:将膜平放于干燥的平面上,将新鲜配置好的 ECL Reagent 滴加到有铅笔记号标注的膜面上,反应 5 分钟后用滤纸在膜的边缘尽量吸去多余的 ECL Reagent,将膜放到化学发光仪中收集信号
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