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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
U251
- 库存:
长期供应
- 供应商:
上海雅吉生物
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人
- 相关疾病:
否
- 物种来源:
人大小鼠
- 免疫类型:
见说明
- 细胞形态:
悬浮
- 器官来源:
见说明
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-372年
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
367 x 10^5 cells/vial
培养操作及注意事项说明
一.产品简介
1、细胞名称:U251 MG;人神经胶质细胞瘤细胞
2、生长特性: □ 贴壁 □ 悬浮 □半悬浮半贴壁
3、细胞生长条件:
| 培养条件 | DMEM(高糖)+10%FBS+1%双抗 |
| 温度 | 37℃ |
| 空气条件 | 5% CO2,,95% AIR |
| 传代方法 | 1:2传代,2~3天换液 |
| 冻存条件 | 90%FBS+10%DMSO |
二.使用方法
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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