产品及特点
本产品是 2×LAMP MagicMix，可以用于 LAMP 等温扩增，LAMP 即
Loop-Mediated Isothermal Amplification（环介导等温扩增），是 2000 年才
出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用 4 条模板专一的特异引物和具有链
置换能力的 DNA 聚合酶，在等温条件下(63℃左右) 30－60 分钟完成扩增。该
技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于 PCR 技术，同时还
不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪
器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体
的快速检测。本试剂盒具有下列特点：
1. 即开即用的 2×LAMP MagicMix，含有红色电泳示踪剂，扩增后可以直接
上样，不需要上样液。
2. 高特异性，由于同时使用 4-6 条特异引物，所以特异性比 PCR 更高。
3. 高扩增效率，扩增效率可达到 10E9-10E10，比 PCR 灵敏一个数量级，可
检测到单拷贝的 DNA 分子
4. 65℃左右等温扩增，可以不需要贵重的热循环仪。
5. 即开即用，包含了除引物和模板 DNA 外的所有成份，十分方便。
6. 肉眼检测扩增结果，不需要昂贵的电泳、荧光 PCR 等仪器。
7. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的 LAMP 扩增。
8. 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。
9. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
规格及成分
成 份
编 号
热封袋包装
2×LAMP MagicMix
100203a 500 uL（绿色盖）
LAMP 阳性对照模板-引物混合物
130923a 45 uL（黄色盖）
使用手册
100203sc
1 份
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 LAMP 模板、LAMP 引物、自备可见光染料
使用方法 1. 制备模板DNA：选用合适的方法制备模板DNA。
2. 配制自备的5×LAMP引物混合液。
先加超纯水或自备TE缓冲液将自备的下列6种（或4种）引物干粉稀释到母
液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯
水，最后得到1mL的5×LAMP引物混合液，此混合液足够250次20uL体系
的LAMP扩增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积异于1mL，则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。
引物名称
母液浓度
加母液量
在 5×LAMP 引物
如果没有 Loop 引
物，则用水替代
终体积
1 mL
3. 在冰上融化2×LAMP MagicMix，混匀，稍离心。如果有N个样品，则在
N+2个反应管中加入以下组份：
成份
样品管
LAMP
阳性对照
LAMP
阴性对照
2×LAMP MagicMix
10 uL
10 uL
10 uL
自备 5×LAMP 引物混合液
4 uL
不加
4 uL
自备模板 DNA
1-100ng
不加
不加
LAMP 阳性对照模板-引物混合物
不加
4 uL
不加
补自备超纯水到
20 uL
20 uL
20 uL
注意：此步可加入自备的各种LAMP可视化染料，这样反应结束后可以根据
反应液的颜色变化或实时荧光强度变化来判断是否有扩增，不需要开盖，避
免污染。如果加入了荧光染料，则需要在荧光定量PCR仪上进行反应和实时
检测。
4. 混匀，置于63℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温，必须加热盖。如果
用金属浴或水浴保温，没有热盖，必须覆盖50uL的石蜡油，否则保温期间
反应体系的水分会蒸发，影响反应效率。
5. 产物取扩增产物5 uL直接上样（本产品含有红色电泳示踪剂，不需要再加
上样液，红色示踪剂的泳动速度相当于50bp的DNA）进行2-3%的琼脂糖
凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱。
6. 结果分析：如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照
不能扩出，则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带，则试剂盒的问题，请跟厂家联系。如果阴性对照（水作为模板）有扩增出条带，
则说明LAMP样品或试剂有过去的扩增产物的污染，需要注意操作的规范
性，如果不能解决，可以重新设计引物扩增新的靶片段。也可以使用不需要
开盖的2×可视化LAMP MagicMix。
注意事项 1. 引物设计对成功扩增十分关键，尽量以保守区设计引物。
2. 引物至少包括 F3/B3 和 FIP/BIP，加入环状引物 F loop/B loop 可
以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC 含量和尽量避免二级结构。
4. LAMP 扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备
等优点。但太高的灵敏度使得其比普通 PCR 扩增更加容易污染导致假
阳性。因此，必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验
分区、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染，很难去
除，最好重新设计引物扩增新的靶片段。
5. 要确证扩增的为目标基因，可以使用特定的限制性酶切和 /或
Southern 杂交。
关联产品 LAMP 可视化染料 A 型(CAT#:130833)
文献和实验
技术资料