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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
150
- 供应商:
上海彩佑
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
免疫组化法
- 应用:
免疫组化观察成像
- 适应物种:
见说明书
- 标记物:
见说明书
- 样本:
见说明书
- 规格:
50T/100T
该试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物(HRP Streptavidin Conjugate,HRP-SA)为基础,可用于检测细胞、组织内的特异性抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的一抗与相应靶抗原结合后,用生物化二抗与一抗特异性结合,最后加入HRP-SA,形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA复合物,显微镜下观察成像。
注意事项:
1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。
3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会影响结果观察。
5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。
牛布病抗体(Brucellosis-Ab)免疫组化试剂盒,试剂盒所含试剂:
试剂A 通透液:0.1% Triton-X 100 10 mL(选用)
试剂B 封闭缓冲液(封闭用) 20 mL
试剂C (原装进口分装)已稀释的即用型一抗(2.5ml)
试剂D (原装进口分装)生物素化羊抗兔IgG 1支(浓度1.5 mg/mL,稀释比为1:300~1:500)50 μL+抗体稀释液20ml
试剂E HRP-SA复合物1支(浓度1 μM,稀释比1:50~1:200)100 μL
试剂F DAB显色液 5ml
牛布病抗体(Brucellosis-Ab)免疫组化试剂盒在这里,我们更加建议各位老师和同学,可以考虑购买我们公司该产品的一抗和Sp免疫组化试剂盒一起做免疫组化实验,这样可以熟悉实验,增加实验成功率,优化实验成果步骤。
即用型SP(Streptavidin-Peroxidase)免疫组化检测试剂盒是利用LAB-SA第二代技术生产的免疫组化检测试剂,最大特点是高灵敏度,低倍景染色,直接滴加,操作方便,孵育时间短,适用于冷冻切片、石蜡切片及固定的细胞涂片。可用于检测我公司的一抗。SP试剂盒内容:
无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
试 剂 A:封闭用正常山羊血清工作液
试 剂 B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
试 剂 C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
用户自备试剂:
1.10mM TBS(pH7.2~7.4),三羟基氨基甲烷1.21g,氯化钠7.6g
加蒸馏水800mL,浓盐酸调pH值至7.2~7.4,最后定容至1000mL
TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%体积比)
2.抗原修复液(依检测抗原不同而选择不同的修复液)10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液柠檬酸0.38g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水900mL,浓盐酸调pH值至6.0,最后定容至1000mL或:0.5M EDTA修复液(pH8.0)EDTA·2H2O 186.1g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水 700mL,用10mM NaOH调pH值至8.0,最后定容至1000Ml
3. 缓冲甘油封固剂10 mL
4. Tween 20 5 mL
牛布病抗体(Brucellosis-Ab)免疫组化试剂盒,石蜡包埋组织切片免疫染色
实验步骤(建议方案):
石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O洗2×2min;
4.抗原修复:根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)
注:有些抗原勿需修复,直接进入第5步封闭。
5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),37℃湿盒中孵育30 min;
13.洗涤: TBS-T洗涤(3×5 min),TBS洗涤(2×5 min);
14.显色:应用DAB溶液(试剂F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
更多详情信息请来电咨询我们,欢迎新老客服咨询订购:牛布病抗体(Brucellosis-Ab)免疫组化试剂盒
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、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等荧光二抗;按照检测物种分,有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛,以及多种细菌类二抗;另外,还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。如果您对上述产品感兴趣,请致电027-84454412,或13317111952到***捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
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