SRF Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括SRF Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：SRF Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测
编号：SY0141
英文名：SRF Luciferase Reporter Plasmid
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
SRF Luc荧光素酶报告基因质粒(SRF luciferase reporter plasmid)是用于检测SRF转录活性水平为目的的报告基因。SRF(Serum response factor)是转录因子MADS box超家族的一员，主要调控即早基因的激活(例如c-fos)，从而参与细胞的周期调控、生长和分化等。

SRF Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Serum Response信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMSRF-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个SRF结合位点，可以高灵敏度地检测SRF的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得SRF报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMSRF-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

除SRF Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测外，我公司正在打折促销以下产品：

·*化乙锭
编号：SY0249
英文名称：Ethidium Bromide (EB)
规格：1g
本品为粉末状EB，可配制成10mg/ml的储存液。用于电泳检测时，工作浓度为 0.5μg/ml。*化乙锭，英文名Ethidium bromide，缩写EB，一种DNA嵌入剂，可插入DNA/RNA中，其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍，因此在低浓度（10μg/ml）染色后无需脱色，是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。*化乙锭已用于核酸的许多荧光分析，还可结合到单链 DNA（虽然强度不高）和三链 DNA 上。另外，EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。

使用方法

一、胶染法（电泳前染色）

1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml（每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液）。
2. 按照常规方法进行电泳。

注意事项

1) 此方法比较节省染料，250 μL（10mg/ml）染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，对于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下，线状双链DNA的迁移率减小了15%。

二、泡染法（电泳后染色）

1. 按照常规方法进行电泳。
2. 室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3. （可选）对于检测较小量DNA（＜10ng），可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min，从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。

储存条件：室温，避光，有效期4年。

·5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
编号：SY0349
英文名称：Ethidium Bromide (EB)
规格：2ml
本品用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer)，是一种经过改良的以*酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。

SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的空间结构，消除了蛋白结构之间的差异。因此，电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。

注意事项
1) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
3)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液必须完全溶解后再使用。

操作方法
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·27mm透析袋(透析分子量3.5kDa)
编号：SY0411
英文名称：Dialysis Tube MD34 (Mw3,500)
规格：1卷（5米）
透析袋通常为半透膜制成的袋状，以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换，透析的主要原理是：透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外，直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析。

本透析袋参数：扁平宽度为34mm，直径27mm，截留分子量3.5kDa。
储存条件：4℃，有效期2年。

注意事项
1）每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
1）把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段，具体长度需根据待透析的样品而定。
2）在大体积（eg.500mL）的2%（W/V）的碳酸**和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3）用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4）放在大体积（eg.500mL）的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5）冷却后，存放于4℃，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
【注】：从此时起取用透析袋必须戴手套。
6）在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7）使用时，一端由透析夹夹紧，另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液。
【注】：
① 通常要留1/3～1/2的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大或样品含盐量较高时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大，如大烧杯等。

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