免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液大量库存促销
品牌：百奥莱博
编号：SY0318
规格：100ml
产地：国产|进口
英文名：Lysis Buffer for WB/IP Assays
本品细胞/组织裂解液，WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，含有sodiu*(代"m") pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodiu*(代"m") orthovanadate和leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解，并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。

注意事项
1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 细胞样品
1）融解WB/IP裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解WB/IP裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

更多有关免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液大量库存促销的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·HIF-1-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0078
英文名称：HIF-1 luciferase reporter plasmid
规格：1μg
HIF-1荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（HIF-1 luciferase reporter plasimd）是用于检测HIF-1转录活性水平为目的的报告基因。HIF-1(hypoxia-inducible factor-1)是氧平衡有关的关键蛋白并且在癌症的发展，以及在心血管疾病中有着显著作用。

HIF-1报告基因主要用于检测细胞中HIF调控的信号通路活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMHIF-1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个HIF-1结合位点，可以高灵敏度地检测HIF-1的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得HIF-1报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMHIF-1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

·CREB-Luc报告基因质粒
编号：SY0088
英文名称：CREB luciferase reporter plasmid
规格：1μg
CREB报告基因（报告基因质粒）（CREB luciferase reporter plasimd）是用于检测CRE转录活性水平为目的的报告基因。CRE(cAMP-response element binding protein)是一种细胞核内调控因子，它通过自身磷酸化实现调节转录的功能，影响胎儿T细胞的发育、细胞的生存和学习记忆分子神经机制的相关功能。

CREB报告基因主要用于检测细胞中cAMP/PKA信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

PGMCRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个CRE结合位点，可以高灵敏度地检测CRE的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得CRE报告基因更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1.pGMCRE-Lu可以采用常规转染法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.CRE的激活剂，可作为CRE报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。


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·植物组培抗菌剂
编号：SY0624
英文名称：Plant Preservative Mixture (PPM)
规格：25ml
植物组织培养可以依阶段区分为：一、引发愈伤组织( callus )，因为只有callus可以进行组织培养。 二、从callus诱导成根或芽。组培的方式可以分为3种：1）固体培养，将植物组织放置于固体培养基上，通常培养在玻璃瓶或塑胶瓶内。2）平板培养，将植物组织埋于固体培养基中，并且培养在培养皿。3）液体培养，将植物组织培养在液体培养基中，一般来说培养在生物反应器内，可以再细分为静止培养、悬浮培养和漂浮培养。在整个组织培养的过程，最担心的就是微生物的污染，所以用于植物组织培养的抗菌与抗真菌剂是非常必须的。

植物组培抗菌剂（Plant Preservative Mixture, PPM）是一种广谱抗微生物剂，可以杀死细菌和真菌细胞，防止真菌孢子的萌发，并在较高浓度下能消除内源性污染的外植体。研究表明PPM活性成分可以穿透真菌或细菌细胞壁，抑制柠檬酸循环和电子传递链等中心代谢循环中的关键酶的活性，并且可以抑制培养基中的单糖和*基酸向真菌和细菌细胞的运输。PPM能有效地抑制植物细胞和植物组织培养中的通过空气、水、人传播的微生物污染及内源性污染，而不会影响体外种子发芽、愈伤组织增殖和愈伤组织的再生。

与普通的抗生素相比，优势体现在：
1）是一种广谱、高效抗菌/抗真菌剂。
2）比常用抗生素价格更低廉，可以作为植物组织培养基的标准成分，并可作为常规使用。
3）因为它的靶标是抑制多种酶，所以产生抗耐药性的突变体是不可能的。
4）具有热稳定性，可以和培养基一起灭菌。

使用方法

以下所述的操作流程是通用的，可能需要根据待处理的特定物种稍作改动。
1）含有PPM的培养基可以在超净台外面分装，即无需无菌操作，等琼脂凝固后把盖子盖好。如果用泵来分装培养基，建议在分装前后先用高压灭菌处理的热水清理导管/软管。

2）如果储存在无菌容器或在此之前储备液未受污染，含PPM的热敏感或热稳定的液体培养基无需经微孔滤膜或高压灭菌处理。但是对于含有200 mg/L或更多*基酸或蛋白质的富集培养基，建议加入PPM后用滤膜过滤处理。

3）超净工作台里的器具（镊子或解剖刀）无需在火焰上烧，只要定期地在70%酒精里蘸一下即可。超净工作台无需验证，可以在超净工作台外面的干净台面上操作，不超过一小时即可。

4）PPM溶液呈酸性，pH 3.8，需保存在4℃。低接种密度下推荐工作剂量0.05-0.2%（v/v），可在灭菌前或灭菌后加入培养基，防止通过空气传播污染或内源性污染。处理内源性污染或获得无农杆菌的植物材料需要高剂量的PPM。

5）对于一些常规情况下表皮上被大量细菌或真菌孢子污染的种子来说，PPM的抗菌效率可能比较弱。对于体外萌发实验，种子应该按照传统的方法先用漂白剂进行表面消毒。因此，在含有PPM的萌发培养基里，在一个非灭菌的容器中种子可以在自来水下冲洗然后在超净台中吹干。如果所使用的器具末端接触到活性细菌、真菌组织或其它怀疑被污染的东西，这些器具应该通过高压或电子加热设备进行灭菌。

6）一般剂量水平：
除了内源性污染以外，推荐剂量是0.05-0.2%。对于愈伤增殖、器官形成和胚胎形成，推荐的剂量范围是0.05-0.075%。低接种密度或者处理缓慢生长的细菌条件下，在培养基灭菌前或灭菌后加入此剂量的PPM，可防止空气传播的污染和内源性污染。要消除更高密度的内源性污染，需要增加PPM的剂量（参考7-内源性污染）。

7）内源性污染
a. 对于外植体：以1cm（或更短）外植体为例，添加4~5% PPM到完全MS基础盐中，但千万不要添加Tween 20和 pH调整剂，搅拌4~12小时之后直接拿出。不用清洗，直接插入含有PPM的培养基里，若是草本植物换至0.05~0.1%PPM的萌发培养基即可；而木本植物则换至0.2% PPM的萌发培养基。
注意：以下从第7段（b）到10用于观赏植物。
b. 对于块茎，球茎和鳞状物：把整个块茎/球茎/鳞状物在漂白剂里摇或搅拌。然后用水冲洗（可以在非无菌条件下操作）。把块茎/球茎切成小片，在含有4-5%PPM的全基盐中摇或搅拌12-24 h，不要加pH调整剂和Tween 20。不用冲洗直接插入到含有0.1-0.2% PPM的培养基中。

8）如果按照以上操作流程没有取得满意的结果（尤其是厚的和非常密集的外植体、种子），我们建议按照以下流程：
a. 在水中摇或搅拌外植体（较软的组织1h，较坚硬的组织2h）；
b. 在含有50% PPM的完全MS基础盐中（不加pH调整剂和Tween 20）摇或搅拌5-10 min。
c. 无需冲洗，直接把处植体插入到培养基中。如果真菌污染，可以选择额外再加入PPM到培养基中。
然而，对于细菌或混合污染，第一个月在培养基中加入0.05-0.2%的PPM是必要的。不要丢弃高度氧化的外植体，因为大约50%的外植体在4-6周内即可恢复正常。

9）为了消除“组培中”污染的植物材料（抢救措施）：
注意：仅适合明显观察到受污染不超过一周的组织。
a. 在自来水细水流下面用牙刷清洗材料。在含有50% PPM（用灭菌水稀释）中摇或搅拌5-15 min。对于细菌或混合污染，我们建议用低pH值2.8-3.2的溶液，即100% PPM与0.6g/L的柠檬酸溶液（用灭菌水）按1：1混合。
b. 不用冲洗直接把处理好的材料插入到含有0.05-0.2% PPM的培养基里，培养至少一个月。前10天弱光培养，如上所提，不要丢弃高度氧化的外植体，等4-6周以后将约有50%的材料恢复。
对于真菌孢子或细菌位于外植体极深的部位，而PPM无法接触到的情况，需要把材料在水中浸泡一段时间，然后沿着外植体切片，在50% PPM中摇或搅拌5-15 min。通过以上消毒步骤，保证PPM能够充分接触到外植体的整个表面。

10）去除农杆菌：
共培养之后，用水冲洗叶盘。然后把转染的叶盘在含有100% PPM的完全基础盐中蘸（整个叶盘）约2 min。 用两张无菌纸巾吸干放到含有常用抗生素的培养基上。三周后，转到只含有0.05-0.075% PPM的培养基上。

注意事项

1）采用PPM消毒后首次转移的材料，我们建议把外植体完全地插入半固体培养基中。
2）50% PPM溶液能重复利用大约5-10次。重复利用的次数取决于所处理外植体的体积和接种密度。保存50% PPM在4℃以延长它的活性。如有必要，准备两种PPM消毒液：一种是灭菌内源性污染，第二种是灭菌“组培中”的污染。用第二种消毒溶液处理材料后都要用0.2 μm的滤膜滤灭，滤灭过程可以非无菌条件下完成。一个滤器能用于溶液滤灭的整个过程。
3）如果用50% PPM处理材料效果仍不佳，可以用100% PPM。处理方法跟50% PPM相似，但处理时间不要超过10 min。
4）PPM 的使用为任何一个组织培养实验室带来便利，并极大地提高技术人员和实验室的工作效率。但每个实验室的工作条件不同可能使得PPM效力的发挥具有一定的波动性。建议工作人员根据以上步骤操作的前提下，并进行优化调整以确认PPM效力发挥的最佳工作条件，或者确认PPM是否能满足其特定的应用要求。整体来说，PPM是能够非常有效的预防植物样本受到的空气污染，水介质污染以及人源接触带来的各种污染。使用得当，PPM可以拯救内源性污染的外植体；推荐剂量（0.05-0.2%（v/v））下PPM几乎不造成任何负面损伤。

储存条件：4℃


免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液大量库存促销关键词：免疫印迹及免疫沉淀用,Lysis Buffer for WB/IP Assays,免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液,SY0318

SJ0820 *百里香酚蓝
F030607 FITC标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*FITC
ARB13419 鸡α干扰素(IFN-α)血清中含量检测 Chicken interferon α,ifn-α ELISA KIT
ARB13211 小鼠高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)代做ELISA实验 
F020224 兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG
PY02-019B  乙酰胺琼脂  250克  
BTN71207 RNA洗脱液 RNA Elution Buffer
BL0876 兔抗人IgG免疫血清
CD111 超纯dATP(100mM)
Earle"s平衡盐溶液(含**糖，含酚红)  1×EBSS|10×EBSS 500ml
ARB10728 人红细胞生成素抗体(EPO)ELISA代测服务 Human erythropoietin,epo ELISA KIT
ARB12915 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)Elisa分析 Mouse leukemia inhibitory factor receptor,lifr ELISA KIT
丙二酸* Bathophenanthroline 141-95-7
002019 肝素*抗凝牛血 100ml|500ml
PY02-356  2216E  250克  
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液   4×10ml|4×20ml
ARB10865 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)酶标法分析 Human anti-fibrillarin antibody,afa/snornp/u3rnp ELISA KIT
ARB10336 人水通道蛋白3(AQP-3)含量测试 Human aquaporin 3,aqp-3 ELISA KIT
丽春红染色液   100ml
C0401 标准新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY08-068  改良马丁培养基 225ml  20瓶/箱，用于生物制品霉菌检验
50-76-*(代"0") 放线菌*(代"素")D Actinomycin D

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