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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
858
- 英文名:
Hygromycin B
- CAS号:
31282-04-9
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
潮霉素B试剂 抗生素类的品牌:百奥莱博,是优质的抗生素类产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多潮霉素B试剂等抗生素类产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:潮霉素B试剂 抗生素类
英文名:Hygromycin B
编号:QN0023
规格:1g
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本品常用做蛋白质合成抑制剂,可用于植物细胞培养等生化研究。本品是潮霉素B干粉,用于细胞培养实验溶解后过滤除菌。推荐溶剂水,PBS溶液。
CAS:31282-04-9
储存条件:-20℃
别名:湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉
效价:≥950U/mg
潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。
大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
| 终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
注意事项:
1)潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了来自大肠杆菌之外,还发现于其他的菌株,包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2)本品为有毒化合物,避免与皮肤和眼睛接触,请小心操作。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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·2×SYBR Green PCR Mastermix
编号:QN0949
规格:50T|200T
本产品为应用SYBR Green Ⅰ染料进行Realtime PCR扩增反应的高效预混系统。该预混系统提供了经过优 化的缓冲液、dNTP、HotStart Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I染料和MgCl2,使用者只需加入适量的引物、 模板和水,即可进行荧光定量PCR检测。 该预混系统中的优化缓冲液和 HotStart Taq DNA 聚合酶等可大大提高 PCR 产物的灵敏度和特异性。 Realtime PCR MasterMix 采用高效 HotStart Taq DNA 聚合酶,使 PCR 反应具有更高灵敏度和特异性。 本产品可用于荧光 PCR 检测,获得灵敏、准确且可靠的结果。可适合任意荧光定量 PCR 仪,如 ABI7000/7700/7900HT/7300/7500 Realtime PCR System、FTC2000、lightcycler 等。
产品特点:
高特异性:本产品采用热启动 DNA 聚合酶,90℃以上2min后具有扩增活性,可大大提高PCR产物的特异性。
高灵敏度:本产品包含的优化的缓冲液可检测低拷贝数的模板,且重复性好。
高适用性:本产品可适用于任意荧光定量 PCR 仪。
应用实例:模版:提取RNA,反转录成cDNA,模版稀释倍数102﹑103﹑104﹑105,设计的引物扩增的目的片段长度是125bp。
储存条件:-20℃
潮霉素B试剂 抗生素类关键词:湿霉素乙,潮霉素B干粉,效高素,潮霉素B试剂
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·脂肪酶
编号:QN0485
英文名称:Lipase
规格:5g
本脂肪酶常用于定量进行血清中甘油三酯、前列腺素脂分析、脂肪分析等科研领域。
别名:脂肪分解酵素;PPL
CAS号:9001-62-1
储存条件:2~8℃
酶活:100~400U/mg
性状:类白色冻干粉或乳黄色粉末
类型:Type II
来源:猪胰腺
储存条件:2~8℃。
酶活定义:37℃,pH7.4条件下,1单位脂肪酶1小时可催化水解1微(克)当量甘油酯酸酯中的脂肪酸,其酶活单位为30-90 u/mg;37℃,pH7.4条件下,1单位脂肪酶1小时可催化水解1微(克)当量橄榄油中的脂肪酸g。
·原花青素
编号:QN0659
英文名称:Procyanidin
规格:5g
原花青素具有极强的抗氧化活性,是迄今为止人类所发现的最强、最有效的自由基清除剂之一,尤其是其体内活性,原花青素的抗氧化活性呈现剂量-效应关系,但如果超出一定的浓度,其抗氧化活性将随着浓度的升高而降低。
CAS号:4852-22-6
分子式:C30H26O13
分子量:594.52
性状:深玫瑰红至浅棕红色精制粉末,低聚物无色至浅棕色
储存条件:常温
抗氧化特点及机理:
①有效地清除超氧阴离子自由基和羟基自由基等,也可中断自由基链式反应;
②参与磷脂、花生四烯酸的新陈代谢和蛋白质磷酸化,保护脂质不发生过氧化损伤;
③为强有力的金属螯合剂,可螯合金属离子,在体内形成惰性化合物;
④保护和稳定维生素C,有助于维生素C的吸收。
潮霉素B试剂 抗生素类关键词:湿霉素乙,潮霉素B干粉,效高素,潮霉素B试剂
潮霉素B试剂怎样保存?
一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂,如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂,应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当,就会失效变质,影响实验的效果,并造成物质的浪费,甚至有时还会发生事故。因此,科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行,获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。
2,2-二羟甲基丁酸 2,6-Dimethylphenol 10097-02-6
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ARB13312 山羊β内啡肽(β-EP)血清中含量检测 Goat beta-endorphin,β-ep ELISA KIT
碳酸*溶液(1mol/L) 100ml|500ml
ARB10941 人低密度脂蛋白受体(LDLR)含量分析 Human very low density lipoprotein receptor,vldlr ELISA KIT
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SJ0650 pGEM-T
ARB13425 鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa检测操作说明书 Chicken acetoacetic acid,acac ELISA KIT
SDS裂解液 50ml|100ml
诺*沙星 Nystatin 70458-96-7
ARB13371 牛结核病(TB)代做ELISA实验
Tris缓冲盐溶液(10×TBS,pH7.4) 500ml
BFD050 *乙醇胺A快速检测卡(最新产品)
盐*(代"酸")四环素 MSG 64-75-5
ARB11055 人*丙*酸(LPA)Elisa定量检测 Human l-phenylalanine,lpa ELISA KIT
37340-57-1 溶壁酶 Lyticase
BL0622 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4FF Glutathione Sepharose 4FF
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