新布尼亚病毒荧光PCR检测试剂盒特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的新布尼亚病毒荧光PCR检测试剂盒特价促销，是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应新布尼亚病毒荧光PCR检测试剂盒特价促销，产品信息：

类别：病毒PCR检测试剂盒

产品名	产品编号	等级含量	包装规格
新布尼亚病毒荧光PCR检测试剂盒	SYA249	科研试剂	48次/盒

产地：国产|进口

编号：SYA249

等级：科研试剂

规格：48次/盒

品牌：百奥莱博

一、简介：

本试剂盒用一对新布尼亚病毒特异性引物，结合特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对新布尼亚病毒 RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中新布尼亚病毒的探针报告基团为FAM。

 

二、用途：

本试剂盒适用于新布尼亚病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

 

三、试剂盒组成：(48T)

组份 数量 规格

新布尼亚荧光qRT-PCR反应液 1管 960μL/管

酶混合物 1管 48μL/管

阴性对照 1管 250μL/管

阳性对照 1管 50μL/管

 

四、储存条件及有效期：

本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

 

五、荧光PCR仪器适用范围：

ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

 

六、样品的处理与RNA提取

6.1 样品前处理

按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。

组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.2g于研磨器中研磨，加入1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL 灭菌离心管中；液体样品，直接取100μL提取。

6.2 RNA提取

可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。

 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

 

七、检测步骤：

7.1 试剂的准备

从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液、RT-PCR Reaction Buffer、酶混合物，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量

荧光SFTSV反应液 20µL N×20µL

酶混合物 1µL N×1µL

总量 21µL N×21µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照/阳性对照4μL，10000rpm瞬时离心10秒。

7.2 qRT-PCR反应条件

将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。

推荐循环条件:

反转录(Reverse Transcription) 1循环 42℃ for 20 min

预变性 1循环 95℃ for 10 min

PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec

55℃ for 30 sec

在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

 

八、结果分析：

8.1 结果分析条件设定

直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。

8.2 试验成立判定

（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。

（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。

（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。

8.3 结果判定

（1） 在试验成立的条件下，Ct值<35的样本为阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性。

（2） Ct值显示为无或Ct值≥38的样本为阴性样本，表明新布尼亚病毒核酸阴性。

（3） 如果35≤Ct值<38，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。

（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行新布尼亚病毒 qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

 

九、注意事项：

（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。

（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。

（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。

（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

 

新布尼亚病毒荧光PCR检测试剂盒特价促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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