玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒怎么卖

玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒怎么卖

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  • ¥4200 - 5800
  • 百奥莱博
  • SYA279-YQL
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博生产销*(代"售")的玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒怎么卖,是高品质的转基因PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。


    名称:玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒怎么卖
    品牌:百奥莱博
    规格:48次/盒
    等级:科研试剂
    产地:国产|进口
    编号:SYA279

    欲了解更多玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒怎么卖的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·博卡病毒(HBocaV)/偏肺病毒(HMPV)双重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA189
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中偏肺病毒/博卡病毒的特异性检测。适用于偏肺病毒/博卡病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。

    本试剂盒用一对偏肺病毒型特异性引物,一对博卡病毒型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对偏肺病毒/博卡病毒RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中偏肺病毒型的探针报告基团为FAM,博卡病毒型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。

    试剂盒组成:

     
    组份 数量 规格
    偏肺病毒/博卡病毒反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX) 1管 576μL/管
    qRT酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 192μL/管
    无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
    阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
    偏肺病毒/博卡病毒阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC) 1管 50μL/管


    储存条件:-20℃以下,有效期6个月。

    使用方法:

    一、样品采集:
    按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
    ➤血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
    ➤血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
    ➤拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
    ➤病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。

    二、RNA提取:
    可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

    三、检测步骤:
    1.试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
    设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 12µL N×12µL
    酶混合物 4µL N×4µL
    总量 16µL N×16µL

    计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC)4μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
    2.qPCR反应条件
    将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
      反转录(Reverse Transcription) 1循环 50℃ for 30 min
    预变性 1循环 95℃ for 5 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 10 sec
    55℃ for 45 sec

    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测HMPV,VIC/HEX/JOE基团检测HBocaV。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

    四、结果分析:
    1.结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
    2.试验成立判定
    ➤阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
    ➤阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
    ➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
    3.结果判定
    ➤FAM通道:Ct值≤35HMPV核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明HMPV核酸阴性。
    Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明HMPV核酸阳性;否则判为样本阴性。
    ➤VIC/HEX/JOE通道:Ct值≤35 HBocaV核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明HBocaV核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明HBocaV核酸阳性;否则判为样本阴性。

    五、注意事项:
    ➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    ➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
    ➤PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
    ➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    ➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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