北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家
规格：48次/盒
产地：国产|进口
等级：科研试剂
编号：SYA190
一、简介：
本试剂盒用一对冠状病毒型特异性引物，一对博卡病毒型特异性引物，分别结合一条特异性荧光探针，用一步法双重荧光RT-PCR 技术对冠状病毒/博卡病毒RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中冠状病毒型的探针报告基团为FAM，博卡病毒型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。

二、用途：
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中冠状病毒/博卡病毒的特异性检测。适用于冠状病毒/博卡病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
冠状病毒/博卡病毒反应液(HCOV/HBocaV-qRT-PCR MIX) 1管 576μL/管
qRT 酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 192μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
冠状病毒/博卡病毒阳性对照(HCOV/HBocaV-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(HCOV/HBocaV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 12µL N×12µL
酶混合物 4µL N×4µL
总量 16µL N×16µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入16μL，向每管中加处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HCOV/HBocaV-PTC)4μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 50℃ for 30 min
预变性 1循环 95℃ for 5 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 10 sec
55℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道，可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测HCOV，VIC/HEX/JOE基团检测HBocaV。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
(2) 阳性对照(HCOV/HBocaV-PTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效
8.3 结果判定
(1) FAM通道：Ct值≤35HCOV核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明HCOV核酸阴性。
Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明HCOV核酸阳性；否则判为样本阴性。
(2) VIC/HEX/JOE通道：Ct值≤35 HBocaV核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明HBocaV核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明HBocaV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


想要了解更多关于北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
ARB12578 大鼠高密度脂蛋白(HDL)elisa检测说明书 Rat high density lipoprotein,hdl ELISA KIT
70-26-8 L-Ornithine L-鸟*酸
维生素C检测试剂盒(磷钼酸比色法)   50T
C0401 标准新生牛血清(无菌过滤)
ARB12653 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白(EotAxIn 1/CCL11)代做ELISA实验 Rat eotaxin 1 ELISA KIT
BL1298 10×多聚赖*酸
ARB10887 人抗流行性脑膜炎病毒(PV-Ab)Elisa方法检测 Human anti-encephalitis virus  pv,ep-ab ELISA KIT
对羟基*丙*(代"酮")酸 Boc-L-Phenylalaninol 156-39-8
ARB13545 兔子D二聚体(D2D)Elisa定量检测 Rabbit d-dimer,d2d ELISA KIT
BTN90605 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit
83-88-5 核黄素 Riboflavin(Vitamin B2)
PY01-113  胃蛋白酶(1:3000)含糖  250克  
002012 枸橼酸纳抗凝兔血
甲基-α-D-吡喃半乳糖苷 TPP 97-30-3
BTN90309 红细胞裂解液B型(流式细胞分析用) Red Cell Lysis Solution,Type B
ARB13389 牛溶菌酶Lysozyme Elisa方法检测 
CD111 超纯dTTP(100mM)
放线菌*(代"酮") N-Acetyl-L-Glutamine 66-81-*(代"9")
悬浮培养基(SM)  2% 500ml
北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家关键词：百奥莱博,SYA190,冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒

PY02-087  玫瑰红*琼脂  250克  
CYB163061 兔抗羊IgG-FITC
BTN130430 E.coli DNA聚合酶 Ι E.coli DNA Polymerase I
ARB11546 人凋亡相关半胱*酸肽酶4(CAsp4)血清中含量检测 Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,casp4 ELISA KIT
pH标准缓冲溶液(pH=4.00)   50ml|100ml
ARB12236 大鼠血管内皮生长因子(VEGF)代做ELISA实验 Rat vascular endothelial cell growth factor,vegf ELISA KIT
ARB11957 大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免费代测 Rat collagen type Ⅲ,col Ⅲ ELISA KIT
BL0909 FITC标记兔抗豚鼠IgG抗体
L0203 IgG(1、2a、2b)类单克隆抗体腹水纯化试剂盒
肌酸激酶(兔肌) Sephadex G-100 9001-15-4
茜素红S染色液  0.1%|0.2% 100ml
维生素C G-6-P-Na 50-81-7
BTN100538 *蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液 Calpain Inhibitor Ⅱ Solution
BTN60204 非酶多糖清除剂(RNA专用) PS Erasol(RNA)
PY08-071  李氏增菌肉汤1(LB1) 225ml  20瓶/箱，用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家关键词：百奥莱博,SYA190,冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒

ARB10673 人血管紧张素Ⅳ(ANGⅣ)酶标法分析 
ARB14005 鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)检测服务 Deer serum amyloid a,saa ELISA KIT
PY02-359  沙氏葡萄糖琼脂培养基  250克  
BTN130802 ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒 ADP/ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit
657-27-2 L-Lysine L-赖*酸盐*(代"酸")盐
PY02-324  含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤  250克  
ARB11763 人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA代测服务 Human atp-binding cassette transporter a1,abca1 ELISA KIT
N-乙酰-L-半胱*酸 L-Pyroglutamic acid 616-91-1
邻*二甲醛 Monoacetone glucose 643-79-8
ARB12099 大鼠去甲肾上腺素(NA)含量分析 Rat noradrenaline,na ELISA KIT
ARB13212 小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)含量检测 Mouse factor-related apoptosis,fas ELISA KIT
B0601 山羊血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
DMSO(PCR级)   10ml
亚苄基丙*(代"酮") Acid alizarin blue B 122-57-6
F030842 BIOTIN标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY*BIOTIN
ARB12614 大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)定量分析 Rat lymphocyte function associated antigen 3,lfa-3 ELISA KIT
2,6-二**醌*亚胺 HBTU 537-45-1

我公司生产供应销*(代"售")的病毒PCR检测试剂盒产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京冠状病毒/博卡病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家。