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966
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒厂商由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒厂商
规格:48次/盒
等级:科研试剂
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SYA207
脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒厂商正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA114
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对鼠疫杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对鼠疫杆菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于检测全血等样品中的鼠疫杆菌(YP),用于鼠疫杆菌(YP)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
YP反应液(YP-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
YP阳性对照(YP-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
6.2 RNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽液体,按以下说明进行DNA核酸的提取。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50μL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5ml EP管,-20℃保存。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(YP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15 µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(YP-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(YP-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鼠疫杆菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鼠疫杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒厂商关键词:百奥莱博,SYA207,脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒
·玉米转基因GA21单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA282
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA387
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA425
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·霍乱弧菌(O139)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA073
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·立克次体通用单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA127
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对立克次体通用特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对立克次体通用的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测全血等样本中的立克次体通用,用于立克次体通用感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照:均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明立克次体核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明立克次体核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明立克次体核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒厂商关键词:百奥莱博,SYA207,脊髓灰质炎病毒3型荧光PCR检测试剂盒
·猫源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA308
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肉毒杆菌8种通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA016
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA457
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·高致病猪蓝耳和猪蓝耳(hp-PRRSV/PRRSV)通用型(二合一)荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA468
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·人副流感病毒2型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA175
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·口蹄疫O型(FMDV-O)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA480
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·羊源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA301
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·疟原虫核酸单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA122
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA092
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛病毒性腹泻(BVDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA490
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·水稻转基因Bt63 单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA272
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·季节性H3流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA149
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪圆环病毒II型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA638
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
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光共振能量迁移(FRET,Fluorescent Resonance Energy Transfer)原理:当两个荧光基团靠近时,高能量荧光基团会将受激发产生的能量转移到相临的低能量荧光基团上。由于标记在探针上的两种荧光基团所发出荧光信号的变化可以反映PCR扩增产物的数量变化,从而使得荧光PCR技术可以起到实时检测的目的。目前,根据荧光基团在寡核苷酸探针上的不同标记形式,各种荧光PCR检测试剂盒所采用的荧光探针基本可以分为三种类型:Taqman探针、分子信标和荧光杂交探针表1: Taqman探针、分子
、biorad的icycler、澳洲的ROTOR GENE3000等,还有就是在01、02年之后任何一台荧光PCR仪都在中国赚得盆满钵满之后许多荧光pcr仪纷纷进入中国,枫岭、MJ等等许许多多,不一而足。每种仪器在市场推广过程中都会“制造”许多与其他产品不同得优势以获得相对得比较优势,但从笔者多年得使用经历和比较中得出一个结论,那就是无论厂商如何宣传,判断一台荧光PCR仪的好坏的依据不是PCR反应时间(它不是百米赛跑),不是PCR体系大小(它不是蔬菜)。不是PCR仪器大小(它不是彩电),而是PCR扩增水平
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