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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括沙门菌荧光PCR检测试剂盒北京现货促销在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:沙门菌荧光PCR检测试剂盒北京现货促销
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
编号:SYA058
等级:科研试剂
产地:国产|进口
沙门菌荧光PCR检测试剂盒北京现货促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
KREBS-RINGER缓冲液 500ml
ARB13502 鸡催乳素(PRL)含量检测 Chicken prolactin,prl ELISA KIT
BTN130657 无机焦磷酸酶,热稳定 Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
SJ0084 Benzamidine HCl hydrate 苄脒盐*(代"酸")盐水合物
ARB13171 小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)Elisa定量检测 Mouse receptor activator of nuclear factor kappa b ligand,rankl ELISA KIT
BTN90303 硅胶膜DNA离心吸附柱(大提) Silica Spin Column For Maxiprep
BTN100838 遗传霉素(G418)干粉 G418 Sulfate(Geneticin)Powder
ARB10246 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA检测服务 Human hepatitis b virus,hbv pres2ag ELISA KIT
玫红酸 L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochloride 603-45-2
FMOC-D-缬*酸 Pululan 84624-17-9
蔗糖酯 γ-L-Glutamyl-β-naphthylamide
叶绿体蛋白提取试剂盒 50T|100T
BL0904 FITC标记羊抗马IgG抗体
卡那霉素硫*(代"酸")盐 DAB 25389-94-0
L-甲状腺素* DAB 25416-65-3
BL1293 考马斯亮蓝快速染色液
乙酸镧 2,6-dibromoquinone chlorimide? 100587-90-4
沙门菌荧光PCR检测试剂盒北京现货促销关键词:沙门菌荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA058
·小反刍兽疫病毒(PPRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA575
等级:科研实验专用
·猪肺炎支原体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA487
等级:科研实验专用
·禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA368
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·脑膜炎奈瑟菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA111
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·东部马脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA234
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·黄热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA229
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·Nipah病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA237
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·腺病毒(ADV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA141
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·流感嗜血杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA043
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒H7亚型(AIV-H7)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA332
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·结核分枝杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA046
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·金黄色葡萄球菌单重荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)
编号:SYA005
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Staphylococcus aureus
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对金黄色葡萄球菌特异性引物,对金黄色葡萄球菌DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的金黄色葡萄球菌(SA),用于金黄色葡萄球菌(SA)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
金黄色葡萄球菌PCR反应液(SA-PCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(SA-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-2010)要求进行。
6.1.2 粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
注:上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:建议采用相关标准方法进行前增菌,并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(SA-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(SA-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(SA-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明SA核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明SA核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行SA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明SA核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
沙门菌荧光PCR检测试剂盒北京现货促销关键词:沙门菌荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA058
·冠状病毒(OC43)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA181
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪伪狂犬野毒病毒(PRV-gE)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA413
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·轮状病毒A/B分型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA220
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小反刍兽疫病毒(PPRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA575
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·立克次体通用单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA127
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对立克次体通用特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对立克次体通用的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测全血等样本中的立克次体通用,用于立克次体通用感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照:均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明立克次体核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明立克次体核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明立克次体核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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