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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括北京禽流感H7N9病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家价格在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:北京禽流感H7N9病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家价格
等级:科研试剂
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
编号:SYA151
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·肠出血性大肠杆菌致贺毒素1(Stx1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA084
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·马尔堡病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA232
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·冠状病毒(OC43)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA181
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA664
英文名称:Mycoplasma Bovis ELISA Antibody Test Kit
等级:科研实验专用
规格:96次/盒
【主要成分】
组份 数量 规格
包被板 1 块 96T
阴性血清对照 1 管 1ml/管
阳性血清对照 1 管 1ml/管
样品稀释液 1 瓶 50ml/瓶
10×洗液 1 瓶 30ml/瓶
兔抗牛IgG酶标抗体 1 瓶 12ml/瓶
底物显色液 1 瓶 12ml/瓶
终止液 1 瓶 6ml/瓶
说明书 1 份
【作用与用途】
适用于牛血清中牛支原体抗体的检测。
【用法与判定】
1、试剂准备
仔细阅读说明书,所有的试剂在使用前需放置于室温至少1小时,使试剂盒恢复到室温。
2、洗涤液的配制
取1 份10×洗液加入到9份双蒸水中,混匀。配好的液体,应在3天内用完。
3、稀释待检血清。用样品稀释液将待检血清做1∶160(VV)倍稀释(建议在1.5ml微量离心管中加入400μl 样品稀释液,吸取2.5μl 待检样品加入该管中充分混匀)。
4、操作步骤
4.1 加样
包被板上对照和待检样品添加如下所示。
4.2 孵育
将稀释好的样品加入包被板中,100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.3 洗涤
甩去孔内液体,用稀释好的洗涤液洗涤包被板,300μl/孔,振荡洗涤3次,拍干。
| 1 | 2 | |||||||||||
| 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |||
| A | P | S1 | S2 | S3 | S4 | |||||||
| B | P | |||||||||||
| C | N | |||||||||||
| D | N | |||||||||||
| E | ||||||||||||
| F | ||||||||||||
| G | ||||||||||||
| H |
(注:“P”为阳性血清对照;“N”为阴性血清对照;S1、S2、S3、S4 为待检血清样品)
4.4 二抗孵育
向各孔中加入兔抗牛IgG 酶标抗体,100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.5 洗涤
方法同4.3。
4.6 显色
加入底物显色液,100μl/孔,置室温(15~25℃)下,避光孵育9分钟。
4.7 终止
加入终止液,50μl/孔,轻微震荡混合均匀。
4.8 读数
在加入终止液15分钟内,将包被板置于酶标仪中,用波长450nm(OD450)读数。
4.9 S/P值计算
按照以下计算公式,计算S/P值。
4.10 判定标准
4.10.1 试验结果有效的条件是:阳性血清对照OD450值均应≥0.8,阴性血清对照OD450 值均应<0.1。
4.10.2 待检样品的S/P 值≥0.418时,判定为阳性;待检样品的S/P值<0.418时,判定为阴性。
【注意事项】
(1)所有试剂在2~8℃条件下保存。
(2)贮存时,所有的板条一定要用封口膜密封,防止潮气对包被板的损伤。
(3)不要使底物溶液接触强光和氧化物。取出后,不得再加回瓶中。
(4)仔细阅读说明书。
(5)不要使用过期的成分或者不同批次试剂混合使用。
(6)稀释10×洗液时,如发现存在结晶,可置37℃下加热使其溶解后再使用。
(7)注意加样和洗涤过程,以确保试验的准确度,不能用嘴吸液。
(8)被检血清发生腐败时勿用于检测。
(9)检验用器皿必须清洁,操作过程避免与金属类器物接触。
(10)在加样时,应使各孔的加样时间差别小于5 分钟,以保证各孔反应时间一致。
(11)操作过程中使用手套,终止液是硫*(代"酸"),如接触,应用清水迅速冲洗接触部位。
【贮存与有效期】
2~8℃保存,有效期为9个月。
北京禽流感H7N9病毒双重荧光PCR检测试剂盒厂家价格关键词:百奥莱博,禽流感H7N9病毒双重荧光PCR检测试剂盒,SYA151
·副溶血性弧菌TDH/TLH/TOXR/TRH四重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA110
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·呼肠孤病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA767
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对呼肠孤病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用一步法荧光qRT-PCR 技术对呼肠孤病毒核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适用于检测咽拭子等样本中的呼肠孤病毒(AR)的特异性检测。用于呼肠孤病毒(AR)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
呼肠孤病毒反应液(AR - qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列,博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6 个月。
六、样品采集、前处理与RNA 提取
6.1 样品采集
采集禽的咽拭子标本,应使用专用采样拭子,适度拭抹咽后壁和扁桃体部位,应避免触及舌部,迅速将拭子放入标本采集管中,旋紧管盖并密封,以防干燥。
6.2 样本前处理:
6.2.1 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。
棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.2.2 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于
阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(AR- qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AR-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AR-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明呼肠孤病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明呼肠孤病毒核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行呼肠孤病毒qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明呼肠孤病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验。临床诊断的品种如HBV/HCV及禽流感诊断试剂盒性能优良、供应充足,基本实现国产化。在猪流感病毒RNA核酸序列明确的情况下,利用现有的试剂研发平台,人感染猪流感实时荧光定量PCR诊断试剂盒很快就会面世。实时荧光定量PCR技术在猪流感诊断中的作用已有法规确立在人感染猪流感病毒出现以前,针对猪与猪传染的传统猪流感疫情,近年来我国科技人员经过不懈努力,探索快速检测与诊断方法].人感染猪流感疫情发生后,美国疾病预防控制中心(CDC)于2009年4月28日发布了针对人感染猪流感病毒治疗和预防临时指南
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