大龄酵母DNA提取试剂盒北京厂家

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖大龄酵母DNA提取试剂盒北京厂家在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：大龄酵母DNA提取试剂盒北京厂家
英文名：Yeast DNA Massive Extraction Kit
编号：ALH156
品牌：百奥莱博
规格：10次
产地：国产|进口
本试剂盒用于快速的从酵母中大量提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份：
酵母裂解液——————100ml×2
蛋白沉淀液——————70ml
DNA溶解液 ——————30ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：
1. 吸取60ml-70ml 酵母培养物到一个100ml 离心管；2,500 x g 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入20 ml 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。
如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入6.8 ml 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 2,500 x g(可根据需要调整加大离心力)离心5 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的100ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇，颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 2,500 x g 离心5 分钟(可根据需要调整加大离心力)，在管底可以见到白色的DNA沉淀块，倒弃上清。
11. 加入20ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，2,500 x g 离心2 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入1-3ml DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入0.5-1ml RNase A（10mg/ml），颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间或者增加RNase A 用量。如果残留RNA 不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/*仿抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：酵母基因组DNA大量提取试剂盒|酵母DNA大量提取试剂盒|大龄酵母DNA提取试剂盒

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F010201 小鼠抗鸡IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgG(IgY)
PY08-069  四硫*(代"磺")酸盐亮绿培养基 10ml  20支/盒，用于沙门氏菌选择性增菌培养
乌来糖 Glutaric anhydride 51-79-6
ARB14002 猪髓过氧化物酶(MPO)elisa检测说明书 Porcine myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
657-27-2 L-Lysine L-赖*酸盐*(代"酸")盐
葡萄糖-6-磷酸脱*酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)   100T
BTN130569 GAPDH小鼠单抗 GAPDH Mouse Mab
BL1194 瑞氏-姬姆萨复合染液
ARB10896 人抗着丝点抗体(ACA/CENP)elisa测定使用说明书 Human anticentromere antibody,aca/cenp ELISA KIT
9006-59-1 卵清蛋白 Albumin  Egg
PY02-322  Skirrw琼脂  250克  
BL1068 麦芽汁琼脂
ARB11667 人维生素C(VC)elisa检测说明书 Human vitamin c,vc ELISA KIT
钌红 4-Hydroxybiphenyl 11103-72-3
大龄酵母DNA提取试剂盒北京厂家关键词：酵母DNA大量提取试剂盒,酵母基因组DNA大量提取试剂盒,大龄酵母DNA提取试剂盒


·酵母DNA提取试剂盒
编号：ALH154
英文名称：Yeast DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
本试剂盒用于快速的从酵母中提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份(100次)：
酵母裂解液——————30ml
蛋白沉淀液——————10ml
DNA溶解液 ——————5ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
1. 吸取1.5ml 酵母培养物到一个1.5ml 离心管； 12,000rpm 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入300μl 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入100μl 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀20 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 13,000rpm 离心5-10 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的1.5ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇（约400μl），颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 12,000rpm 离心1 分钟，在管底可以见到白色的DNA 沉淀块，倒弃上清。
11. 加入1ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，12,000rpm 离心1 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入40μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入10-15μl RNase A（10mg/ml），或者1-2μl RNase A（100mg/ml）颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间。如果残留RNA不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/*仿抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。


大龄酵母DNA提取试剂盒北京厂家关键词：酵母DNA大量提取试剂盒,酵母基因组DNA大量提取试剂盒,大龄酵母DNA提取试剂盒


·高纯酵母质粒大量提取试剂盒
编号：ALH093
英文名称：Yeast high purity plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
规格：10次
本试剂盒适用于大规模高纯度酵母质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合破壁酶特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， 最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)—————————0.75ml
破壁酶—————————-————1g
溶液YP1—————————————75ml
溶液YP2—————————————75ml
溶液YP3—————————————110ml
去蛋白液PD-———————————100ml
漂洗液WB-————————————25ml×2
洗脱缓冲液EB-——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)-——————10套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达到至少6000g，带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 通常酵母质粒拷贝数都很低，高拷贝质粒最大得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为：1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择高效率的感受态细胞。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成， 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇， 0.1M Na2EDTA，14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法：在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇，加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ，不需要调节PH 值，定容到1L，4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml，由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大，以上仅供参考。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

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