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- 库存:
752
- 英文名:
DNA Ladder (0.2-10 kb, 21 bands)
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DNA Ladder(200bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)价格由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DNA Ladder(200bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:DNA Ladder(200bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)价格
编号:YT020
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本品是一种即用型DNA分子量标准,包含了1 Kb DNA Ladder和100bp DNA ladder共21条双链DNA条带,可以满足各种常规DNA电泳分析的分子量参照需要。
本品条带分布更加均匀细致,便于对照DNA分子量。本产品中500bp、1000bp和3000bp条带用黑体标记,亮度较高,使辨别条带更加容易。具体每条带的DNA的含量可以参考右图进行计算。本DNA ladder中已添加了含有*酚蓝的DNA上样缓冲液,可以直接使用。

储存条件:4℃,有效期6个月。
注意事项:
1. 如果使用强致癌的*化乙锭(EB),须注意避免DNA ladder在使用时被*化乙锭污染,操作时一定要采取适当的防护措施。推荐使用本公司无毒的核酸红色染料(YT015)或核酸绿色染料(YT016)。
2. 电泳时请尽量使用未用过的电泳缓冲液和新配制的琼脂糖凝胶,以免影响电泳效果。
更多有关DNA Ladder(200bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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·RNase H
编号:YT511
英文名称:Ribonuclease H
规格:100U
本酶是一种核糖核酸内切酶,可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。RNase H不能水解单链或双链DNA或RNA中的磷酸二酯键,即不能消化单链或双链DNA或RNA。
特点:特异性消化DNA-RNA杂合链中的RNA,常用于cDNA第二链的合成。
用途:DNA-RNA杂合链中去除RNA,例如cDNA第二条链合成前去除mRNA;通过互补的DNA序列实现对RNA的定点剪切;除去杂交到poly(dT)上的mRNA中的poly(A);体外多腺苷酸化反应(polyadenylation reaction)产物研究。
来源:E.coli MRE-600细胞。
分子量:约18.4kDa(单体)。
活性定义:37℃20分钟内,能够催化1nmol杂合双链中的RNA形成酸可溶性核糖核苷酸形式所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:20mM Tris-HCl(pH7.8),40mM KCl,8mM MgCl2,1mM DTT,24μM[3H]-poly(A).poly(dT),0.03mg/ml BSA ,4%(v/v)glycerol。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含其它核糖核酸酶。
酶储存溶液:25mM HEPES-KOH(pH8.0),50mM KCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.1mg/ml BSA,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):200mM Tris-HCl(pH7.8),400mM KCl,80mM MgCl2,10mM DTT。
失活或抑制:65℃加热10分钟可使RNase H失活。金属离子螯合剂和巯基封闭剂均能抑制RNase H活性。
储存条件:-20℃。
使用说明:
1. DNA-RNA杂合链中去除RNA:
a. 用反转录酶,例如RT M-MuLV反转录酶或RT M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成cDNA第一条链,70℃孵育10分钟终止反应。
b. 在冰浴上向已经合成第一条链的20µl反应体系中依次加入如下试剂:
Reaction Buffer (10X)————2µl
无核酸酶去离子水——————217.8µl
RNase H (5U/µl)——————20.2µl
c. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
d. 37℃孵育1小时。
e. 加入2.5µl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
f. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化合成的双链cDNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
说明:其他情况DNA-RNA杂合链中去除RNA的条件可以参考上述条件进行。RNase H反应的pH范围约在7.5-8.3均可。
2. 杂合链中RNA的去除和cDNA第二链的合成:
a. 用反转录酶,例如RT M-MuLV反转录酶(YT392)、RT M-MuLV反转录酶(RNase H-)(YT393)或cDNA 第一链合成试剂盒(RNase H-)(YT395)合成cDNA第一条链,70℃孵育10分钟终止反应。
b. 在冰浴上向已经合成第一条链的20µl反应体系中依次加入如下试剂:
Reaction Buffer (10X) for DNA Polymerase I————8µl
无核酸酶去离子水—————————————————68.8µl
RNase H (5U/µl)—————————————————0.2µl
DNA Polymerase I, E.coli—————————————3µl (30U)
c. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
d. 15℃孵育2小时。(注意:反应温度不能超过15℃)
e. 加入5µl 0.5M EDTA(pH 8.0)混匀,以终止反应。
f. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化合成的双链cDNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
注:Reaction Buffer (10X) for DNA Polymerase I:500mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25℃),100mM MgCl2,10mM DTT。
3. 其他用途请参考上述用途或相关文献资料进行。
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·苏*酸脱*酶
编号:YT599
英文名称:Threonine Deaminase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的苏*酸脱*酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化苏*酸脱*,生成2-酮丁酸和*。
CAS:9024-34-4
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:
L-threonine = 2-oxobutanoate + NH3 (overall reaction) (1a) L-threonine = 2-aminobut-2-enoate + H2O
(1b) 2-aminobut-2-enoate = 2-iminobutanoate (spontaneous)
(1c) 2-iminobutanoate + H2O = 2-oxobutanoate + NH3 (spontaneous)
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
北京百莱博科技有限公司是核酸电泳和回收产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购DNA Ladder(200bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准)价格。
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文献和实验以λ/Hind III为代表的λDNA酶切片段用作电泳分析中的分子量标准,会发现电泳后分子量条带不对的问题。 解释原因如下:在Lambda DNA分子的左右臂存在着12个碱基组成的具有互补顺序的单链突出端-COS位点,COS位点的退火复性,在λDNA片段电泳分离时会出现问题,含左右臂片段在胶上应出现的地方条带会减弱或完全看不到,而复性的左右臂片段会结合成大的片段,即在较大的分子量区域内产生一个额外的条带,这就造成了不正常的带型。 解决以上问题的办法
(3)双链DNA与寡核苷酸的熔点短于25bp的双链寡核苷酸Tm = 2 (A + T) + 4 (G + C)长于25bp的双链寡核苷酸Tm = 81.5 + 16.6 ( lg[J+] ) + 0.41 (%GC) - (600/N) - 0.63 (%formamide)N -- 引物的长度(以碱基数计算)J+ -- 单价阳离子浓度(4)DNA与表达蛋白之间分子量换算1 kb DNA = 333 amino acid ≈3.7 × 104 Da10,000 Da Protein ≈ 270 bp
例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒)。跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象,Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因?郁闷。说明书上说混合温和是什么意思,我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好?chujun_hust :(1)“跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象”: 可能是由于你点样时,时间太长了,导致样品扩散
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