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- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- ATCC Number：
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 库存：
44
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
低温冷藏
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
上皮样
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
株
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
对细胞的真实性，支持客户鉴定STR或者基因突变测序数据，如证明细胞错误，全额退款。细胞名称 Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使A375细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；1mM丙酮酸钠+4mML-Glutamine；400ug/ml G418
传代方法 1:3~1:8传代；2~3天换液1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,12；D12S391：18,21；D13S317：11,14；D16S539：9,9；D18S51：12,17；D19S433：13,14.2；D21S11：29,30；D2S1338：16,24；D3S1358：15,17；D5S818：12,12；D6S1043：11,14；D7S820：9,9；D8S1179：11,14；FGA：23,23；Penta E：10,12；TH01：8,8；TPOX：8,10；vWA：16,17；
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌产品形式：
公司提供2种形式的产品：
第一种是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，-80C也不是细胞储存的最好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；运费电询(顺丰)。
第二种是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，运费电询(顺丰)。
默认是发第二种，如果想要第一种，请事先告知。
5′-胞苷单嶙酸shēng huà shì jì容量：1公斤
4637-24-5N,N-二甲基价酰按二甲缩醛;1,1-二甲氧基三甲胺; N,N-二甲基二甲氧基甲胺N,N-Dimetxylfonmemi7e dimetxylacetal;N,N-DimetxyldimetxoxymetxylaMine;DMF-DMA;
N-乙酰-L-谷酸shēng huà shì jì容量：RT10克
4-甲基 4-Methyl,≥99% 491-35-0 5G 通用试剂
N-甲基二苯胺 N-Methyldiphenylamine,96% 552-82-9 5G 通用试剂
TOA三辛胺1克5N
102-47-63,4-二录录苄1,2-Dichloro-4-(chlorometxyl)benzene
酚试剂shēng huà shì jì容量：5克
乙酰 Acephate 30560-19-1 1ML 通用试剂
川陈皮素 Nobiletin (≥98%,HPLC) 478-01-3 20MG 标准品
盐酸前黄素，英文名或英文缩写：Proflavine xy7nochloride，级别：高纯，98%，规格：5克
乳糖发酵培养基Lactose Ferment Broth
GLYCOLICACID70%SOLUTION甘醇酸 70% 溶液黄绿色透明液体RTsigma
4,6-二-5-嘧啶甲醛 4,6-Dichloropyrimidine-5-carboxalde... 5305-40-8 1G 通用试剂
硫堇/劳氏青莲/劳氏紫/化-3,7-二基吩噻嗪/7-基-3-亚基-3H-苯并噻嗪化氢/ Thionin BR 1克 国产/进口
BRL-3A(大鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M038小鼠肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL 人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16
团头鲂尾鳍细胞;WCF
LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人细胞裂解液 (阳性对照)
A3细胞，人T细胞白血病细胞 转PYTL基因小鼠支持细胞,15P-1细胞 少突胶质细胞生长添加物OGS
NCI-H2087(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
原代肝实质细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml
CL-0111HL-7702(人肝正常细胞)5×106cells/瓶×2
IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基 100mL
OP9小鼠骨髓基质细胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培养基+20%FBS
LIF Protein Mouse 重组小鼠 LIF 蛋白 (His 标签)
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 T-24(膀胱变移细胞癌)
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌rRTEC, 大鼠小管上皮细胞
786-O [786-0], 人透明腺癌细胞 Human 现货
rCSC, 大鼠心肌细胞
HEC-1A, 人内膜癌细胞系 Human 现货
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-575品牌购买流程 ：
1. 客户确定订购；
2. 公司将合同发给客户签字（电子版或者纸质版），同时快递发票给客户；
3. 由客户报销费用到公司账户；
4. 报账过程中，我公司将复苏细胞，做QC；
5. QC通过，同时费用到账，即可发货给客户（顺丰）。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验为： 此外，IDLV 可在分裂细胞中瞬时表达，非分裂细胞中稳定表达；并且可与任何慢病毒载体配套使用，产生非整合型的慢病毒。 IDLV 的应用场景 IDLV 在应用中有什么优势呢？适用于哪些研究呢？ IDLV-CRISPR / Cas9高精准地进行基因编辑 CRISPR / Cas9 是基因组编辑领域的明星技术，目前慢病毒载体（LV）是递送 CRISPR / Cas9 组分的重要手段，LV 可容纳大的 DNA 载荷并有效转导分裂和非分裂细胞，适用于绝大多数的科学研究。然而，持续表达的 CRISPR / Cas9
近年来，ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷，尤其是CRISPR/Cas9，一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时，各大公司也开发出一系列相应的产品，其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。 目前用的比较多的有CEL I酶，CEL I是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶，活性高，不会产生假阳性。而且CEL I酶是目前生物界发现的唯一能准确切割异源双链DNA中存在错配位点的酶，在遗传学研究和应用领域中扮演重要的角色，多应用在临床诊断领域
文库筛选是 CRISPR 技术里投入最大、返工代价最高的一类实验。一个筛选项目动辄十几周、消耗大量细胞和测序资源，如果前期条件没备好，中途失败的成本极高。 先说结论：开展文库筛选前必须落实五类条件——合适的宿主细胞（能稳定表达 Cas9、能被低 MOI 高效感染、增殖能力足够）、明确的筛选压力或分选读数、充足的细胞数量（覆盖文库所需的 200–1000 倍）、可靠的病毒滴度与 MOI 实测数据、以及配套的测序与生信分析能力。这五项里任何一项缺失，都不建议启动。 --- 一、细胞条件：能不能
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