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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
468
- 英文名:
Stool DNA extraction kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输及保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货粪便DNA提取试剂盒怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货粪便DNA提取试剂盒怎么卖
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100次
编号:BTN70601
本试剂盒是专门用于从各种动物粪便中提取高质量的DNA的试剂。动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞和肠道病原菌,因此通过PCR 对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和传染病的重要材料,具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行遗传分析。但粪便中成分复杂多变,常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分,所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。
产品特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR等后续反应。
2. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30Kb左右。
3.可以同时提取到肠道上皮细胞和肠道病原菌的DNA。
4. 操作过程简单快速,只需要30分钟。
5.扩容性好,既可以在1.5mL离心管中微量提取,也可以在50mL离心管中进行大规模制备。
6. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
注:溶液A和溶液B均为无色液体,溶液A 4℃保存时会产生沉淀,用前需要65℃溶化并混匀。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤为1.5mL塑料离心管中进行的微量提取。如果样品用量增加,需要使用大的离心管,各提取试剂的用量也需要按比例增加。
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,然后取0.5mL 加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。最好使用螺旋盖离心管。
2. 取0.1-0.3 g的新鲜或冷冻的动物粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:一定要让管底的样品充分震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒使之充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 13000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 13000-15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
10. 重复第8 步和第9 步一次。
11. 将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.5mL,否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以弃之不用。
12. 加入2倍体积的乙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,15000g离心5-10分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。注意:最好不要用异丙醇代替乙醇,否则不容易去除带色素的杂质。
13. 加入1mL 75%乙醇(自备),震荡数秒,13000-15000g室温离心3分钟,弃上清。
14. 重复上步清洗一次。注意:75%乙醇洗两次有助于去除PCR 抑制物。
15. 短暂离心,吸弃残留的75%乙醇(约50μL),室温晾干。注意:一定要去除残留的75%乙醇,否则会影响后续反应和电泳上样(样品会飘走)。
16. 加入30μl TE缓冲液溶解沉淀。注意:不知道样品DNA产率前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高,可以再加TE 稀释。如果DNA 有颜色,可以使用柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)纯化一次。
17. DNA 即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和稀释液对照做PCR,最好按PCR 终体积的1/10 加入随赠的PCR 抑制物清除剂(BTN60804)。
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北京现货粪便DNA提取试剂盒怎么卖关键词:粪便DNA提取试剂盒,BTN70601,Stool DNA extraction kit
·Klenow片段(3´→5´exo-)
编号:BTN131235
英文名称:Klenow Fragment(3´→ 5´exo-)
规格:200U
Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物。它保留了DNA聚合酶活性,具有3´→5´外切酶活性,但不具有5´→3´外切核酸酶活性。可以在DNA模板和引物存在的条件下,选择性地催化底物dNTP沿5´→3´方向合成与模板互补的DNA。本产品是重组表达得到。
产品用途:
1.双链DNA 5´突出末端的平滑化。
2.用随机引物制备探针。
3.随机引物标记法。
4.寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
5.双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Klenow片段(5U/μL) | 20μl |
| 10×Klenow Fragment Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物,在37℃、pH7.4的条件下,30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
使用举例:(随机引物的同位素标记反应)
1.在微量离心管中配制下列反应液
| 成份 | 用量 |
| 模板DNA | 25ng |
| 随机引物(6-9mer)(1nmol/μl) | 2μL |
| 补超纯水到 | 14μL |
2.95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
3.加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4.加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5.加入5μl 111TBq/mmol[α-³²P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq,50μCi)
6.加入1μl本产品,反应液共25μl。
7.37℃反应3小时。
8.65℃加热5分钟。
反应液可直接作为探针使用。如有必要,可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。
注意事项:
1.本酶有高度稳定性,稀释时不失活,但剧烈搅拌会失活。
2.由于不含有 5´→3´的外切核酸酶活性,因此没有切口平移活性。
3.可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
4.与T4 DNA Polymerase相比,对模板高级结构的抵抗性能较好。
5.由于对DNA的亲和性较强,过量使用易发生凝集作用从而抑制反应进行。
6.若用于5´突出末端的修饰时,补平后有时会多加一个碱基。
7.与DNA Polymerase I相同,ddNTPs的掺入不受底物抑制。
北京现货粪便DNA提取试剂盒怎么卖关键词:粪便DNA提取试剂盒,BTN70601,Stool DNA extraction kit
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