牛I型胶原(Col I)ELISA试剂盒

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试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成

名称	96孔配置	48孔配置	备注
微孔酶标板	12孔×8条	12孔×4条	无
标准品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	无
样本稀释液	6mL	3mL	无
检测抗体-HRP	10mL	5mL	无
20×洗涤缓冲液	25mL	15mL	按说明书进行稀释
底物A	6mL	3mL	无
底物B	6mL	3mL	无
终止液	6mL	3mL	无
封板膜	2张	2张	无
说明书	1份	1份	无
自封袋	1个	1个	无

注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

 
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

武汉纯度生物科技有限公司，主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、抑制剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量，正如公司名一样，达到“专业规格，纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天，质量为根，诚信为本，创新为魂”的信念，将以优质的产品，完善的服务，为每一位客户的实验保驾护航。
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Recombinant Human Ubiquitin Conjugating Enzyme E2W    重组人泛素结合酶”
Recombinant Human Ubiquitin Carboxyl-Terminal Esterase L3     重组人泛素羧基末端酯酶L3
Recombinant Human Ubiquitin Carboxyl-Terminal Esterase L5    重组人泛素羧基末端酯酶L5
Recombinant Human Ubiquitin Fold Modifier Conjugating Enzyme 1    重组人泛素结合酶1倍的改性剂
Recombinant Human UDP-Glucose Dehydrogenase    重组人UDP-葡萄糖脱氢酶
Human Uromodulin    人素
Canine Uromodulin    犬尿调节素
Recombinant Human Uridine Monophosphate Synthetase    重组人尿苷酸合成酶
Uracil DNA Glycosylase    尿嘧啶DNA糖基化酶
Recombinant Human Typhimurium Uridine phosphorylase     重组人鼠伤寒沙门氏菌尿苷磷酸化酶
Recombinant Salmonella Typhimurium Uridine phosphorylase     鼠伤寒沙门氏菌重组尿苷磷酸化酶
Recombinant E.Coli Uridine phosphorylase     重组大肠杆菌尿嘧啶核苷磷酸化酶
Recombinant Urease    重组尿素酶
Recombinant Urate Oxidase    重组尿酸氧化酶
Recombinant Human Uroporphyrinogen Decarboxylase    重组人尿卟啉原脱羧酶
Human Urokinase    人尿激酶
Recombinant Human Uroporphyrinogen III Synthase    重组人尿卟啉原III合成酶
Recombinant Human Tryptophanyl-tRNA Synthetase    重组人色氨酰-tRNA合成酶
Recombinant Human WW Domain Containing Oxidoreductase    含有氧化还原酶重组人WW结构域
Recombinant Human Tyrosyl-tRNA Synthetase    重组人类酪氨酰-tRNA合成酶
Recombinant Human Tyrosyl-tRNA Synthetase 2    重组人类酪氨酰-tRNA合成酶2
Recombinant Human YOD1    重组人yod1
Recombinant Human Activin A Receptor, Type IB     重组人活化素受体，IB型
Recombinant Human Adenosine Kinase    重组人腺苷激酶
Recombinant Human Adenylate Kinase 1    人重组腺苷酸激酶1
Recombinant Human Adenylate Kinase 2    人重组腺苷酸激酶2
Recombinant Human Adenylate Kinase 3 Like 1    人重组腺苷酸激酶3像1
Recombinant Human Adenylate Kinase 4    人重组腺苷酸激酶4
Recombinant Human Adenylate Kinase 5    人重组腺苷酸激酶5
Recombinant Human A Kinase Anchor Protein 7    重组人激酶锚蛋白7
Recombinant Human Protein Kinase B    重组人蛋白激酶
Recombinant Human Activating Transcription Factor-1    重组人活化转录因子
Recombinant Human Activating Transcription Factor-2    重组人活化转录因子-2
Recombinant Human Activating Transcription Factor-3    重组人活化转录因子3
Recombinant Human Activating Transcription Factor-4    重组人活化转录因子-4
Recombinant Human Aurora Kinase A    重组人极光激酶
Recombinant Human Aurora Kinase B    重组人极光激酶
Recombinant Human B lymphoid tyrosine kinase    重组人乙型淋巴结酪氨酸激酶
Recombinant bovine Phosphoinositide 3-kinase a, regulatory subunit    重组牛磷酸肌醇3-激酶，调节亚基
Recombinant bovine  Phosphoinositide 3-kinase alpha p110a/p85a    重组牛磷酸肌醇3-激酶p85α/αP11
Recombinant Human Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase IV    重组人钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅳ
Recombinant Human Cyclin-A2    重组人cyclin-a2
Recombinant Human Cyclin-B1    重组人细胞周期蛋白B1
Recombinant Human Cyclin-B2    重组人cyclin-b2
Recombinant Human Cyclin-C    重组人cyclin-c
Recombinant Human Cyclin-H    重组人cyclin-h
Recombinant Human cyclin-dependent kinase 2    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶2
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase 2 Associated Protein 1    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶2相关蛋白1
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase 2 Associated Protein 2    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶2相关蛋白2
Recombinant Human cyclin-dependent kinase 3    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶3
Recombinant Human cyclin-dependent kinase 4    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶4
Recombinant Human cyclin-dependent kinase 5    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶5
Recombinant Human cyclin-dependent kinase 8    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶8
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor 1A    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor 1B    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor 2C    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2C
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor 3    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂3
Recombinant Human c-erbB2     重组人蛋白
Recombinant Human Calcium and Integrin Binding 1    重组人钙与整合素结合1
Recombinant Human Calcium and Integrin Binding 2    重组人钙与整合素结合2
Recombinant Human Cyclin-Dependent Kinase 2 Interacting Protein    重组人细胞周期蛋白依赖性激酶2相互作用蛋白
Recombinant Human Jun Proto-Oncogene    重组人原癌基因
Recombinant Human Jun Proto-Oncogene (1-241 a.a.)    重组人君原癌基因（1-241 A.A）
Recombinant Human Casein Kinase 2 beta     重组人酪蛋白激酶2
Recombinant Human Casein Kinase 2 beta Active    重组人酪蛋白激酶2β-活
Recombinant Human Casein Kinase 2 Holoenzyme    重组人蛋白激酶2蛋白
Recombinant Human Creatine Kinase Brain     重组人肌酸激酶脑
Recombinant Human Creatine Kinase Brain, His Tag    重组人肌酸激酶脑，他的标签
Human Creatine Kinase Muscle     人肌酸激酶肌
Recombinant Human Creatine Kinase Muscle Type-1    重组人肌肉肌酸激酶-1
Recombinant Human Creatine Kinase Muscle Type-3    重组人肌肉肌酸激酶3
Recombinant Human Creatine Kinase MB Isoenzyme Type-1    重组人肌酸激酶同工酶MB型
Recombinant Human Creatine Kinase MB Isoenzyme Type-2    重组人肌酸激酶同工酶MB型
Recombinant Human Creatine Kinase, Mitochondrial 1A    重组人肌酸激酶，线粒体1A
Recombinant Human Creatine Kinase, Mitochondrial 2    重组人肌酸激酶，线粒体2
Recombinant Human CDC28 protein kinase 2    重组人CDC28蛋白激酶2
Recombinant Human Cytidine Monophosphate Kinase 1    重组人胞苷酸激酶1
Recombinant E.Coli Pantothenate Kinase    重组大肠杆菌泛酸激酶
Recombinant Human Casein Kinase 2 alpha    重组人酪蛋白激酶2
Recombinant Human Protein kinase Casein Kinase 2 alpha, His Tag    重组人蛋白激酶酪蛋白激酶2α，其标
Recombinant Human Casein Kinase 2, Alpha Prime    重组人酪蛋白激酶2，α-
Recombinant Human C-SRC    重组人c-src
Recombinant Human Deoxycytidine Kinase    重组人脱氧胞苷激酶
Recombinant Human Deoxythymidylate Kinase     重组人脱氧胸苷酸激酶
Recombinant Human Epidermal Growth Factor Receptor-Sf9  (ErbB1)    重组人表皮生长因子受体-Sf9（ErbB1）
Recombinant Human Epidermal Growth Factor Receptor-Sf9  (ErbB1), Active    重组人表皮生长因子受体-Sf9（ErbB1），主动
Recombinant Human ELK-1    重组人Elk-1
Recombinant Human Tyrosine Kinase ErbB-2    重组人蛋白酪氨酸激酶ErbB-2
Recombinant Human Tyrosine Kinase ErbB-3    重组人蛋白酪氨酸激酶erbB-3
Recombinant Human Active Focal Adhesion Kinase    重组人活动性局灶性粘连蛋白激酶
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor Receptor-1    重组人碱性成纤维细胞生长因子受体-1
Recombinant Human FGFR1 Oncogene Partner    重组人FGFR1基因的合作伙伴
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor Receptor-2    重组人碱性成纤维细胞生长因子受体-2
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor Receptor-3    重组人碱性成纤维细胞生长因子受体3
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor Receptor-4    重组人成纤维细胞生长因子受体-4
Recombinant Human Riboflavin Kinase    重组人激酶
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1    重组人血管内皮生长因子受体1
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1 D1-3    重组人血管内皮生长因子受体1第1-3天
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1  D1-3, His Tag    重组人血管内皮生长因子受体1第1-3天，他的标签
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1 D1-4    重组人血管内皮生长因子受体1
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1 D1-5    重组人血管内皮生长因子受体1静
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1 D1-7    重组人血管内皮生长因子受体1 d1-7
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-1 His Tag    重组人血管内皮生长因子受体1他的标签
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-3    重组人血管内皮生长因子受体-3
Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor receptor-3 Fc Chimera    重组人血管内皮生长因子受体3