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20×SSC溶液 生化试剂
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北京百奥莱博科技有限公司
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")20×SSC溶液 生化试剂,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:20×SSC溶液 生化试剂品牌:百奥莱博编号:BTN100405规格:250mL产地:国产|进口除20×SSC溶液 生化试剂外,我公司正在打折促销以下产品:·基因转染增强剂编号:BTN140621英文名称:Hexadimethrine bromide规格:0.5mL聚凝胺Polybrene又名为*化己二甲铵、海美*铵,CAS号:28728-55-4。聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强转染效率。Polybrene 增强转染效率原理图如下:产品特点:1.Polybrene广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒介导的基因转染等实验,可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的转染效率。2.Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。3.Polybrene还是一种有效的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞;还可用于蛋白测序,小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象;PVDF 膜上加入Polybrene能提高膜的亲和性。储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。使用方法:慢病毒感染举例:1.第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。2.第二天感染前,从-80℃冰箱取出病毒,冰浴融化,参考相关文献或者根据预实验得到的MOI 值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。 注意:轻轻混匀,不要使用振荡器。3.吸去细胞原有培养基,将按照MOI 稀释好的病毒液+培养基+ Polybrene(对于293细胞,终浓度6μg/mL)加入细胞中,轻轻摇匀。37℃培养过夜。 注:病毒液-培养基-Polybrene 混合液,按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2mL,100mm培养皿3mL),37℃预热;②加入病毒轻轻混匀;③加入Polybrene 至终浓度为2μg-12μg/mL。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI高于20时,建议客户添加Polybrene(终浓度2~12μg/mL,浓度因不同的细胞而异,具体的请参考相关文献)来提高病毒的感染效率。如果感染目的细胞是Jurkat,kasumi,NB4,H929,GBC-SD,MCF-7等,建议不要添加Polybrene;大部分原代细胞感染也不需要添加Polybrene,以上仅供参考。4.感染48小时后,吸除含慢病毒的培养基,换为新鲜的培养基。5.继续培养24~48小时后,根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。质粒转染:1.第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。2.准备 DNA-培养基-Polybrene混合液。按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2mL,100mm培养皿3mL),37℃预热;②添加10ng~10μg质粒轻轻混匀;③加入Polybrene 至终浓度为5μg-10μg/mL。 轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。3.去除培养基,在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液,在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h 轻柔混匀。4.去除 DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1×HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3mL,100mm培养皿4mL)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s,使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。5.立即去除DMSO shock solution,用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5mL培养液清洗,100mm培养皿每次用10mL培养液清洗。6.加入完全培养基到细胞中,根据需要进行后续实验。 稳定转化:去除生长培养基,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。 瞬时表达:去除生长培养基,加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。备注:Polybrene的使用浓度依据细胞种类,转染方法等影响,以下使用浓度仅作参考。1.为提高腺病毒转染效率和LacZ转基因表达,使用6μg/mL Polybrene处理病毒载体后转入BHK-21细胞(MOI为100),转染率提高到95%,没有用Polybrene处理的只有2.3%转染率。2.在KSHV(Kaposi"s sarcoma-associated herpesvirus)纯化和转染实验中,浓缩的病毒与8μg/mL Polybrene加到BCBL-1细胞中37℃下孵育2h。3.在逆转录病毒构建研究中,用v-rasHa 逆转录病毒转染角质细胞(Keratinocytes)后在含有4μg/mL Polybrene培养基中培养3天,病毒滴度为1×107 virus/mL,MOI 为1。4.在shRNA编码的慢病毒载体的转染研究中,病毒上清中加入8μg/mL Polybrene,转染到HEK293细胞中。5.在慢病毒shRNA转染研究中,将含有6μg/mL Polybrene的新鲜培养基加入到培养24h的RCC10细胞中,用慢病毒颗粒转染细胞。20×SSC溶液 生化试剂关键词:20×SSC溶液,百奥莱博,BTN100405 我公司生产的20×SSC溶液纯度高价格低,质量有保证,客户更放心。我们为科研用户提供上千种生物试剂现货及sigma全线产品原装期货,货期短,价格低,质量好。用我们100%的真诚、热情换取您100%的信任与支持!·先锋霉素溶液编号:BTN120685英文名称:Cephalotin Solution规格:1mL本产品为浓度100mg/mL的先锋霉素水溶液。参考浓度50mg/mL。先锋霉素(7-(2-Thienylacetamido)cephalosporanic acid sodiu*(代"m") salt;Cephalotin sodiu*(代"m") salt),分子式:C16H15N2NaO6S2,分子量为:418.42,CAS号:58-71-9,溶于水。头孢菌素类抗生素因有共同的母核——7-*基头孢烷酸而得名,不同种类的头孢菌素所带侧链不同,而侧链是人工接上的,所以头孢菌素是一种半合成抗生素。之所以又叫“先锋”,那是从“头孢”的原文Ceph=.cefo译音而来。储存条件:常温运输、4℃避光保存、有效期一年。·即用型蓝白T载体C型(T7-T3,无MCS)编号:BTN120513英文名称:Instant Blue-White Vector T,Type C规格:20次本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5´都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。产品特点:1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。3. 无Nde I和Nco I等多克隆位点,便于重组基因的克隆4. 来源于pBlueSoript Ⅱsk(+),故克隆位点两侧分别有T7和T3 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。7.含有丝状噬菌体f1复制起始子,可以制备单链DNA。产品组成:
我公司正在打折促销生化试剂全系列产品,恭候您的咨询选购20×SSC溶液 生化试剂。
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