北京现货Flemming固定液优惠价

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百奥莱博专业生产供应北京现货Flemming固定液优惠价，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货Flemming固定液优惠价
编号：BTN140410
品牌：百奥莱博
英文名：Flemming Fixative Solution
规格：250mL
产地：国产|进口
本产品为铬酸-锇酸-醋酸混合固定液，现配现用。该固定液对脂肪组织既有固定作用，又有染色作用，对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。该液不适合做HE的染色。应用该液固定的组织，切片不能太大过厚，一般1-2毫米。固定时间1-3天，后经水洗，保存于80%酒精中。可用于各种植物组织的固定。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

更多有关北京现货Flemming固定液优惠价的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·T4 DNA连接酶
编号：BTN60609
英文名称：T4 DNA Ligase
规格：200U
T4 DNA连接酶从表达T4 gene 30的E.coli细胞中分离纯化而得，由一个分子量为68KDa的单亚基组成。

产品用途：
1．催化连接反应，即dsDNA，dsRNA和DNA/RNA分子的粘性末端和平末端5´-P末端和3´-OH末端之间形成磷酸二酯键。
2．修复dsDNA反应中的切口(Nick)。
3．催化pyrophosphate和ATP之间的磷酸交换反应(Weiss酶单位定义原理)
4．需要ATP、Mg2+和DTT，最佳pH为pH7.5-8.0。
5．NaCl浓度在200mM以上时有抑制作用。
6．1%～10%PEG和150～200mM NaCl能促进连接反应(尤其是平末端DNA)效率。

产品组成：

 

成分	规格
T4 DNA连接酶(5U/μL)	40μl
10×T4连接酶Buffer	300μl
说明书	1份

注意：本公司本产品的单位按Weiss 单位定义，200个Weiss单位相当于25000个连接单位，1000个Weiss 单位相当于125000个连接单位。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(DNA片段和载体DNA的连接)
1．在微量离心管中制备下列连接反应液

10×T4 DNA Ligase Buffer	2.5μl
自备插入DNA片段	约0.3pmol
自备载体DNA	约0.03pmol
T4 DNA Ligase	1μL
dH2O	up to 25μL

2．16℃过夜反应
3．加入2.5μL的3M醋酸*(PH5.2)
4．加入62.5μL的预冷无水乙醇，-20℃放置30-60分钟
5．离心回收沉淀，用70%的预冷无水乙醇清洗沉淀，真空干燥
6．25～50μL TE溶解，10-20μL转化至100μL感受态细胞中。


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·甲基化专一性PCR试剂盒
编号：BTN100923
英文名称：Methylation Specific PCR Kit
规格：50次
本产品是基于PCR的甲基化DNA检测试剂盒(即MSP试剂盒)。它由两个成分组成，一个是亚硫*(代"酸")*盐试剂盒，用于将DNA中所有没有甲基化的C转化成U，而甲基化的C不变。二是优化的PCR试剂盒，利用客户自备的专一性引物，根据PCR来检测甲基化位点的位置。

产品特点：
1．本产品是亚硫*(代"酸")盐修饰试剂盒和即用型PCR 3.0的整合，即开即用，非常方便。
2．柱式DNA回收方法极大提高亚硫*(代"酸")盐修饰后DNA的回收率。
3．优化的PCR mix，含有PCR所需要的所有成分，减少了操作误差。
4．PCR结束后可以直接上样电泳，非常方便。
5．用户需要自备MSP专一性引物。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B成分一(干粉)	2.3g×5瓶
溶液B成分二(干粉)	110mg×5瓶
通用溶胶液	50mL×2
离心吸附柱	50套×2
通用洗柱液	100mL
DNA洗脱液	10mL
PCR MagicMix 3.0	1.5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(PCR MagicMix 3.0要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

自备试剂：超纯水、MSP引物、对照DNA模板和引物。
 注：严格的实验一般要求下列5种对照DNA模板和相应的引物对，用户可以根据自身实验的要求只做其中的部分。

对照名称	起始DNA	处理
未修饰未甲基化DNA对照	未甲基化DNA (无甲基化宿主菌或体外扩增而得)	未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
已修饰未甲基化DNA对照	未甲基化DNA(同上)	经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
未修饰甲基化DNA对照	甲基化DNA (用甲基化酶修饰未甲基化DNA而得)	未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
已修饰甲基化DNA对照	甲基化DNA(同上)	经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
未修饰样品DNA对照	样品DNA	未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰

使用方法：

Ⅰ．亚硫*(代"酸")*盐修饰
一、准备试剂
1．配制溶液B成分一溶液：加5.0mL超纯水和27μl溶液A到装有溶液B成分一干粉的棕色塑料瓶中，轻柔摇晃至溶(尽量少的剧烈摇晃，约需要5分钟)，总体积约5.5mL。
2．配制溶液B成分二溶液：加10mL超纯水到装有溶液B成分二干粉的棕色塑料瓶中，轻柔摇晃混匀(尽量少的剧烈摇晃)。
3．配制溶液B工作液：将55μL溶液B成分二溶液加入到溶液B成分一溶液中，轻柔颠倒混匀即可使用。一瓶溶液B工作液可以用10次。
二、DNA变性处理
1．将5μL溶液A加入到45μL DNA溶液中并吹打混匀(总体积没有45μL需要用水补足到45μL，DNA总量在0.2-5μg之间，不能超过 5μg，一般使用2μg DNA即可)。 注意：DNA必须是线状的，长度最好在20-50 Kb左右。基因组DNA可以预先用酶切处理(酶的位点不得在研究的DNA序列之内)，也可以用机械打断法处理(得到的DNA一般在20-50 Kb左右)。
2．37℃放置15分钟使DNA充分变性。
3．立即在DNA溶液中加入500μl溶液B工作液，轻柔颠倒混匀。
4．55℃避光保温8-16小时。如果使用水浴或没有热盖的PCR仪器保温，最好加50-100μL石蜡油，避免水分蒸发。
 注意：必须避光保温。55℃处理8小时足以使95%的C变成U，保温时间过长会引起DNA的断裂。如果有的区域的C难以转化成U，可以改用两步式PCR处理(每55℃保温3小时后95℃变性处理5分钟，共5-10个循环)，效果会更佳。
5．冰浴10分钟。
6．加入1mL的通用溶胶液，颠倒混匀后取一半溶液上柱。单链DNA会结合在离心吸附柱上，亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
7．12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8．取另一半溶液再上柱，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上，亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
9．加入0.7mL通用洗柱液，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。此步可以洗涤残留的亚硫*(代"酸")*盐。
10．干甩半分钟后，将离心吸附柱转移到一个新的离心管中，加入50μl新鲜配制的溶液A稀释液(5μl的溶液A原液与45μl的超纯水混合而得)，室温放置2分钟后离心半分钟。
11．将洗脱下来的DNA溶液放置在37℃保温15分钟。
12．加入0.7mL的通用溶胶液，混匀后上柱。
13．12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上，杂质等将穿透过柱。
14．干甩半分钟后，将离心吸附柱转移到一个新的离心管中，加入50μl DNA洗脱液，室温放置2分钟后离心半分钟。
15．所得溶液即为亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA，可以用于下面的甲基化专一PCR。
 说明：此方法的回收率一般为50%，2μg DNA最后可以得到1μg的修饰后的DNA。由于修饰后的DNA呈长短不一的单链，EB染色效果很差，所以不能用灵敏度低的琼脂糖电泳-EB染色的方法检测，但可以用灵敏度更高的PAGE-银染方法检测。

Ⅱ．甲基化专一性PCR(以60μL的标准PCR反应体系为例)
1．在一干净的PCR管中，加入下列成分(冰上操作)：

成分	样品管	对照管
PCR MagicMix 3.0	30μl	30μl
亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA模板	100-500ng	无
对照DNA模板	无	100-500ng
自备MSP引物F	25pmol	无
自备MSP引物R	25pmol	无
对照模板专一性PCR引物F	无	25pmol
对照模板专一性PCR引物R	无	25pmol
补水到	60μl	60μl

 注：有5种对照DNA模板可以供用户根据自身需要选择，详见自备试剂栏。
2．将混合物混匀，放入PCR仪中进行热启动PCR，结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。


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PY01-048  羟基磷灰石  5克  
ARB10555 人发动蛋白2(DNM2)酶联免疫定量检测 Human dynamin 2,dnm2 ELISA KIT
ARB10133 人P27蛋白(P27)定量分析 Human p27 protein ELISA KIT
ARB13351 牛弓形虫(Tox)elisa检测操作说明书 
ARB13455 鸡白痢抗体检测(PD)免费代测 chiken pullorum diseaes,pd ELISA KIT
ARB13198 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)检测服务 Mouse lipoprotein-associated phospholipase a2,lp-pl-a2 ELISA KIT
ARB10811 人抗百日咳病毒(PT-Ab)酶标法分析 Human anti-pertussiu toxin,pt-ab ELISA KIT
68-94-0 次黄嘌呤 Hypoxanthine
SJ0298 Glufosinate-ammonium 草铵膦
*检测试剂盒(Calmagite微板法)   100T
魔芋胶 D-Val-Leu-Lys PNA?2HC1 37220-17-0
ARB10147 人REST协阻抑因子3(RCOR3)Elisa方法检测 Human rest corepressor 3,rcor3 ELISA KIT
4-*乙酰**(代"胺") Hematin 539-03-7
L0202 小鼠IgM类单克隆抗体腹水纯化试剂盒
磷脂铁苏木素(FeH)染色液   3×100ml
ARB11672 人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA代测服务 Human vitamin d-binding protein,dbp ELISA KIT
ARB10443 人甲状腺球蛋白(TG)含量测试 Human thyroglobulin,tg ELISA KIT
胞苷 Murexide 65-46-3
PC4801 miRNA cDNA 第一链合成试剂盒

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