50mL亲和层析柱 蛋白质研究

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")50mL亲和层析柱 蛋白质研究，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：50mL亲和层析柱 蛋白质研究
编号：BTN140653
英文名：Affinity Chromatography Colum(50mL)
产地：国产|进口
规格：50mL
品牌：百奥莱博
本产品适用范围广泛，可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子；还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等)，通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。

亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法，其示意图如下：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

常用亲和标签及纯化方案：


关于50mL亲和层析柱 蛋白质研究的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
D-*甘*醇 IBA-K 56613-80-0
3,4-二**甲醛 MC 6287-38-3
ARB10919 人抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-Ab)免费代测 
BTN131165 4×核酸液相杂交液 Nucleic Acid Hybridization Solution
总胆红素(TBIL)检测试剂盒(BOD比色法)   50T
ARB13336 牛免疫球蛋白A(IgA)含量测试 
ARB12369 大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)尿液中含量检测 Rat transferrin receptor,tfr ELISA KIT
包涵体分离缓冲液   500ml
ARB13073 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)Elisa定量检测 Mouse tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,tnfsr-Ⅱ ELISA KIT
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-3-丙磺酸 BPA 16052-06-5
CYB162040 羊抗鸡IgG(抗血清) 0.5ml
BTN131095 生物素化的辣根过氧化物酶 Biotin-HRP
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·PCR专用LIC克隆套装
编号：BTN120402
英文名称：LIC Cloning Kit for PCR
规格：1μg
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术，它效率高,尤其适用于大规模分子克隆，其原理如下：


产品特点：
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。

产品组成：

 

成分	规格
LIC载体(50μg/μL)	1μg
溶液A	10μl
溶液B	150μl
阳性对照插入片段	8μl
说明书	1份

储存条件：-20℃运输及保存，有效期一年。

一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意：如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意：必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
 注意：PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1：1。
2.室温放置5分钟。注意：保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。


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·微量蛋白沉淀试剂盒
编号：BTN81217
英文名称：Mini Protein Precipitation Kit
规格：50次
本产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品，其原理是通过酸使蛋白质变性，溶解度降低，在离心条件下沉淀，而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。

产品特点：
1. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
2.产品稳定，可室温长期放置。
3.可以处理各种液体样品(如细胞或细菌培养物，细胞裂解物，蛋白质提取物等等)。
4.浓缩效果强，可浓缩浓度低达1μg/mL的蛋白。
5.可用于含SDS的样品，但灵敏度稍低(5μg/mL)。
6. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法一：用于不含SDS的样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL
1、将100μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2、加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置15分钟。
4、加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5、冰上放置60分钟。
6、4℃12000～15000×g离心10分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000～15000×g离心15分钟。
9、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
11、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质TCA污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

使用方法二：用于含SDS的样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL
1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品(浓度不低于5μg/mL)转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2、加入8μl溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4、4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
5、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6、加入1mL冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质TCA污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品，热情期待您的咨询选购50mL亲和层析柱 蛋白质研究。