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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
812
- 英文名:
Uracil DNA Glycosylase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)品牌用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)品牌
产地:国产|进口
规格:500U
英文名:Uracil DNA Glycosylase
E.coli尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)催化尿嘧啶从含尿嘧啶的DNA上释放。UDG能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,但不能从6碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。其反应原理图如下:

活性定义:1单位指每分钟催化60pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需要的酶量。通过检测37℃条件下,30分钟从50μl含0.2μg DNA(10⁴~10⁵cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。
产品应用:在37℃条件下,1单位UDG与0.1μg含尿嘧啶DNA温育10分钟后,此DNA不能再被DNA聚合酶复制。95℃加热10分钟可使该酶95%的活性丧失。由于95℃热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物DNA的降解,也可以立即用酚/*仿抽提反应产物。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
备注:UDG在较广的pH范围内均有活性,最适pH是8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(>200mM)所抑制。
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)品牌极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Cre重组酶
编号:BTN130665
英文名称:Cre Recombinase
规格:50U
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别元件是一个34bp序列,其两端是两个13bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据 loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP 位点的DNA将被融合。两个正向重复 loxP位点间的DNA将以环状形式切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。

产品用途:
➤ 两个loxP位点之间DNA的切割。
➤含loxP位点DNA分子的融合。
➤ loxP位点之间DNA序列的翻转。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Cre重组酶,1000 U/mL | 50μl |
| 10× Reaction Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟使0.25μg的pLox2+对照DNA产生最大位点特异性重组所需要的酶量。最大重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行*苄抗性平板筛选。
热灭火:70℃加热10分钟。
使用举例:
1.按下列组份配制反应液:
| DNA溶液 | - |
| 10×Reaction Buffer | 5μl |
| Cre重组酶 | 1μl(1U) |
| 超纯水 | Up to 50μL |
2.37℃孵育30分钟。
3.70℃孵育10分钟,灭活酶活。
注意事项:
1.建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
2.由于Cre重组酶反应是一个动态平衡过程,用loxP2+对照底物仅有20-30%发生重组。由于重组产物的量较少,故*化乙锭染色后呈现微弱条带,同时伴有底物染色强度相应减弱。
3.延长温育时间不会提高重组效率,相反,还可能导致大分子量重组产物的生成。
4.反应中增加Cre重组酶量将形成loxP依赖性Cre-DNA复合物,从而抑制重组反应。
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)品牌关键词:尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG),Uracil DNA Glycosylase,BTN130646
·CHAPS
编号:BTN131043
英文名称:3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate
规格:5g
CHAPS全名是(3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate),中文名是3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐,多一个羟基就是CHAPSO,全名是3-[(3- 胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2- 羟基-1- 丙磺酸盐。它们的特点是能够破坏非特异性蛋白相互作用。与非离子型去垢剂相比引起蛋白聚集的几率更小。电中性并且不会引起变性。可以通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·Methacarn固定液
编号:BTN131291
英文名称:Methacarn Fixative Solution
规格:250mL
本产品为甲醇、*仿、乙酸等混合固定液。Methacarn固定液对核内抗原的保存效果较好,适用于某些抗原、癌基因蛋白产物检测的固定。固定时间应根据组织块大小确定,一般室温固定4-24小时。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期半年。
·表面RNase清除剂
编号:BTN3090
英文名称:Surface RNase Scavenger
规格:250mL
本品是我司独家开发的特殊的RNase灭活剂。它含有多种成分,能高效灭活固体表面的RNase污染,保障RNA工作环境的清洁。
产品特点:
1.高效。本产品原液能在5分钟内将固体表面的多达100μg的RNase 彻底灭活,效力和速度远远高于常用的DEPC。
2. 此外还能灭活RNase T1、 RNase H、BAL31、 S1、Mung bean nuclease等RNase和DNase。
3. 无毒。跟强致癌的DEPC 不同,本产品对人体没有任何毒害。
4. 使用简单。处理后不需要高压灭菌。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
水的处理:
直接将固相RNase 清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中,混合均匀后室温放置24小时即可直接使用,得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。但如果需要溶解RNA,建议使用液相RNase 清除剂(BTN3091)。
工作平台的清洁:
直接将固相RNase 清除剂原液或10倍的新鲜稀释液喷于台面,5分钟后用普通吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。
注意:由于一般的工作平台RNase污染都很严重,建议使用固相RNase 清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。
实验仪器的清洁:
用浸有固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase 清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。用固相RNase 清除剂原液处理金属器械的时间不能超过5分钟。
注意:由于一般的实验仪器RNase污染都很严重,百奥莱博建议使用固相RNase 清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。
玻璃和塑料器皿的清洁:
将器皿浸泡在固相RNase 清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中,静置处理5分钟后取出,再用固相RNase 清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
注意:由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的RNase污染都比较严重(但一般比工作平台和实验仪器干净),百奥莱博建议第一次浸泡使用固相RNase清除剂的10倍或100倍新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于1000倍的稀释液。
移液枪的清洁:
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在固相RNase 清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中一分钟,再用固相RNase 清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在固相RNase 清除剂的1000倍的新鲜稀释液中5分钟以上(最好不要有气泡),然后再用固相RNase 清除剂1000倍或10000倍的新鲜稀释液充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)品牌关键词:尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG),Uracil DNA Glycosylase,BTN130646
·大肠杆菌TG1电击感受态细胞
编号:BTN160801
英文名称:E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell
规格:50μL×5
TG1电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株,是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃,7小时可见克隆,是主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建,经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。
菌株基因型:[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC培养基等。
使用方法:
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟,待其融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。(注:对于质粒,测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19;对于连接产物,请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA浓度不超过100 ng/μL,体积不超过5μl/50μl感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。
4.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温),用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后,转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等),向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床,37℃,225 rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌,重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大,若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。
注意事项:
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化,最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物,保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时避免用力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
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