北京一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒厂家

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒厂家
品牌：百奥莱博
编号：BTN91203
英文名：One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit
产地：国产|进口
本产品是专门用于小量真核培养细胞中制备胞浆蛋白.细胞质是真核细胞活动的重要场所，很多与新陈代谢和信号传递的蛋白质都存在于细胞质中，这些蛋白就叫胞浆蛋白。

产品特点：
1.一步式操作，整个提取制备过程简便，只需要半小时。
2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜动物组织细胞。
4. 温和裂解法，制备的胞浆蛋白能保持天然活性，可以直接用于活性检测、蛋白浓度测定、各种蛋白质电泳等后续研究。

储存条件：低温运输，4℃保存、有效期一年。

使用方法：
将培养到55%-65%覆盖率的体外培养的真核细胞用胰酶法处理后转移到离心管中，离心30秒，在细胞沉淀中加入0.5mL溶液A，悬浮后冰浴10分钟，振荡10分钟，混匀后室温离心10秒，上清即为细胞浆提取物，可以直接放-70℃保存或直接使用。

关于北京一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
ARB11708 人黑色素细胞刺激素(MSH)代做ELISA实验 Human melanocyte stimulating hormone,msh ELISA KIT
DP315 病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒
ARB14060 鲑鱼补体蛋白3(C3)血清中含量检测 Fish c3 ELISA KIT
芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪*酸 Orange Ⅳ 71989-38-3
高尔基体提取试剂盒   50T|100T
ARB10659 人血管紧张肽酶A(ATA)ELISA检测服务 Human angiotensinase a,ata ELISA KIT
ARB13175 小鼠铁蛋白(FE)Elisa分析 Mouse ferritin,fe ELISA KIT
ARB11427 人热休克蛋白20(HSP-20)尿液中含量检测 Human heat shock protein 20,hsp-20 ELISA KIT
Sorensen磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH5.3-8.04)   500ml
65710-07-8 硫*(代"酸")安普霉素(阿布拉霉素) Apramycin sulfate
Z-甘*酰-L-脯*酰-L-精*酰对硝基*(代"*")胺醋酸盐 2-Hydroxyphenylacetic acid 102679-70-9
二*基羰酰二肼 Azocarmine G 140-22-7
BTN130624 9°N DNA连接酶 9°N DNA Ligase
67-68-5 二甲基亚砜 DMSO
半乳糖检测试剂盒(半乳糖氧化酶比色法)   50T
68-94-0 次黄嘌呤 Hypoxanthine
ARB13250 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)Elisa方法检测 Mouse melanocyte antibody,mc ab ELISA KIT
F030825 BIOTIN标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*BIOTIN
十二烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl palmitate 1119-94-4
*百里酚蓝-酚红指示剂   100ml
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pGM-T载体相关试剂盒 
ARB12359 大鼠表皮生长因子(EGF)酶联免疫定量检测 Rat epidermal growth factor,egf ELISA KIT
胞苷 Murexide 65-46-3
9002-93-1 Trion X-100   曲拉通X-100
HC0024 (正方斜口)细胞培养瓶
TEN缓冲液(10×,pH8.0)   500ml
3326-32-7 FITC 异硫*酸荧光素
J0316                  山羊抗小鼠IgG(H+L)抗血清                       
N-*甲酰-L-缬*酰甘*酰-L-精*酸对硝基*(代"*")胺盐*(代"酸")盐 MSNT 64815-80-1
ARB12829 小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)含量测试 Mouse alpha-fetoprotein lens culinaris agglutⅡn 2,afp-l2 ELISA KIT
改进型蛋白电泳考马斯亮蓝脱色液   100ml
BL0852 兔抗大鼠IgG纯化抗体
PY08-079  高斯氏合成培养基平板 9CM  10皿/盒，用于分离、培养与鉴别放线菌
6892-68-8 二硫赤藓醇 DTE
BTN131025 胰凝乳蛋白酶,测序级 Chymotrypsin
C1201 小鼠血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
甘油-孔雀绿染色液   100ml
ARB11915 人鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)酶标法分析 Human squamous cell carcinoma related antigen,sccag ELISA KIT
BL0645 丁基-琼脂糖凝胶H.P Butyl -Sepharose H.P
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·MTT检测试剂盒
编号：BTN111105
英文名称：MTT Assay Kit
规格：500次
MTT广泛用于检测细胞生长，其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱*酶还原生成深紫色的formazan结晶，而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度，并由此推测出细胞的活力，细胞增殖越旺盛，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。其原理如下：


产品特点：
1．采用独特的Formazan溶解液，可以充分溶解formazan，减少误差。
2．背景低，灵敏度高，线性范围宽，重复性好。
3．本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4．可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是检测细胞毒性的试验，其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验)，操作步骤可以以此为基础稍作修改即可，故不再赘述。

㈠、接种细胞
1．按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞，收集到含血清的培养基中。
2．200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3．用培养基重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬浮液并计数。
4．将细胞稀释到2.5×10³个/mL～5×10⁴个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定)，如果不知道生长数度，一般可以稀释到1×10⁴个/mL。
5．将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6．用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞，则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。注意：一定要把细胞加在孔的正中，否则细胞会聚集在孔的角落处，影响试验。
7．用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零)，第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11 列反应的影响。
8．按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天，使细胞进入指数生长期。

㈡、药物处理
9．用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度，则需要预试验确定)，一般一种药物需要做3块平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基，这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物，每列加入一个浓度的药物。
13．按常规方法把96孔板继续放在在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间，此段时间即为药物处理细胞的时间，由用户自己决定。
14．处理结束后去除第2 到第11列(共10列，均含细胞)所有孔中的培养基，并再加入100μL新鲜培养基。
15．每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。

㈢、存活细胞计数
16．在生长末期，去除第1到第11列各孔中的培养基后，再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分)，用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。注意：溶液A在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解，摇匀后使用。MTT有致癌性，一定要带手套操作。
17．小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收，最好尽可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置摇床上低速振荡10分钟，使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19．由于产物不稳定，故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20．计数同样处理的各次重复的平均值。
21．以药物浓度为横轴，以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度绝对值差别很大，一般需将其转化成生长抑制率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为100%)，这样便于计算出IC50，用于各种药物处理效果的比较。注意：如果测生长曲线，则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型，具有促进作用的则斜率加大。

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