一步法大提质粒DNA提取试剂盒价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法大提质粒DNA提取试剂盒价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一步法大提质粒DNA提取试剂盒价格
品牌：百奥莱博
编号：BTN71101
规格：5次
本试剂盒是在我司一步法质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)基础上开发的、能够快速从100mL左右的E.coli培养液中取质粒DNA的产品。它只需要一种溶液即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。它比经典的碱变性质粒制备方法更加快捷和方便。

试剂盒特点：
1.快速，整个质粒DNA提取过程只需要不到30分钟，比传统的碱变性方法快捷。
2.超螺旋比例高，独创的非碱法一步式细菌裂解技术，避免了强碱对DNA的损害，得到的质粒DNA 切口更少。
3. DNA 纯度高，几乎没有基因组DNA和RNA污染，OD260/280一般在1.7-1.9 之间。
4. DNA可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆等实验。
5. 最大吸附量为600μg DNA，具体产率取决于质粒拷贝数。
6. 过程简单，重复性和稳定性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
大离心吸附柱	5套
通用预洗液	100ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用50mL离心管分数次收集10-100mL 新鲜的菌液，一般可以5000rpm离心10分钟，去除上清即得细菌沉淀。
2. 往细菌沉淀中加入20mL溶液A，充分振荡悬浮或吹打混匀。
 注意：充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。
3. 将裂解液全部转移到大离心吸附柱中，放入到配套的收集管中。
4. 6000rpm离心5-10分钟，弃穿透液。离心过滤柱将吸附溶液中的质粒DNA，而将基因组DNA和杂质在穿透液中。如果离心吸附柱中还有未离心下去的裂解液，可以适当延长离心时间直到离心吸附柱中没有残留液体。
5. 将10mL 通用预洗液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
6. 重复上步一次。
7. 将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
8. 重复上步一次。
9.室温6000rpm 空甩5分钟，弃穿透液。注意：此步很重要，不能跳过。
10. 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中，加1mL 通用洗脱液(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳)，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，收集液即是质粒DNA溶液。
11. 重复上步1次以便洗脱更多的质粒DNA。
12. 合并所得质粒DNA，立即使用或-20℃储存。

注意事项：
1．细菌培养时间一般为12-16小时，但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2．菌体过多会造成裂解液粘稠透，需要充分吹打，否则容易堵塞离心柱。
3．通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次，否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
4．质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。一般1.5mL 过夜培养菌体可收获约10μg高拷贝质粒。
5．从生长旺盛的细菌中纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常，它们就是还未来得及分开的相套的质粒，易被误判为基因组DNA。

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·1M Tris-HCl(pH7.5)(DNA级)
编号：BTN101205
规格：250mL

·5´RACE试剂盒
编号：BTN101105
英文名称：5´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是5´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其5´-端序列。本试剂盒就是根据5´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：


产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。

试剂盒组成：

成分	规格
MMLV逆转录酶-RI混合液(RNase H-，200U/μL)	10μl
MMLV Buffer-dNTP混合液	60μl
微量核酸沉淀剂	400μl
TdT(末端转移酶)	10μl
2×TdT Buffer(含dATP)	100μl
PCR MagicMix 3.0	1.5ml
5´-RACE引物A-引物B混合液	100μl
5´-RACE引物C	100μl
RNase-Free水	1ml

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法：

1.变性模板RNA：将1μg mRNA或5μg总RNA加入到一个RNase-free的PCR管中，补RNase-Free水到9μL，65℃保温5分钟后短暂离心，立即放冰上待用。如果RNA浓度偏低，体积超过9μl,可以使用本公司的核酸浓缩剂(需另购,产品编号为BTN110801)浓缩到所需的体积。
2. 设置RT反应(用户可以根据需要设阴性对照)：在上步的含变性后的RNA模板的PCR管中，按顺序加入：

成分	用量
自备的基因专一性引物A(10μM)	4μl
MMLV Buffer-dNTP混合液	6μl
MMLV逆转录酶-RI混合液	1μl
合计	20μl

3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟，50℃保温10分钟，最后75℃保温10分钟使逆转录酶变性。
4. 短暂离心5秒后待用。
5.在PCR管中加入40μl微量核酸沉淀剂(本产品含不溶的核酸助沉剂，用前需要充分摇匀再取用)，震荡混匀。
6.室温12000rpm离心15分钟，小心吸弃上清。
7. 加入1mL自备75%乙醇，室温12000rpm离心5分钟，小心吸弃上清。
8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体后，稍微晾干后加入10μL RNase-free水，充分吹打溶解，得到cDNA溶液。注意：为保证加尾效率，溶解cDNA的RNase-free水最好不要超过10μl。
9. 加尾反应：在10μL cDNA溶液中加10μL 2×TdT Buffer(含dATP)和1μL TdT酶，轻柔吹打混匀。
10. 37℃保温15分钟进行加尾反应，然后75℃保温3分钟灭活末端转移酶。
11. 加入0.5mL RNase-free水稀释加尾反应体系。此稀释液将作为PCR的模板。
12. 第一轮PCR：用不同量的稀释后的加尾反应液设置PCR反应(样品组最好设用量梯度，单位：μL)。

成分	梯度1	梯度2	梯度3	梯度4
PCR MagicMix 3.0	25	25	25	25
自备基因专一性引物B(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
5´RACE引物 A-引物B混合液	2.5	2.5	2.5	2.5
稀释后的加尾反应液	1	5	10	15
RNase-free 水	19	15	10	5
合计	50	50	50	50

13. 按下列条件进行 PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
 第1次循环：94℃ 5分，48-52℃ 2分，72℃ 4分
 第2-30次循环：94℃ 40秒，52-60℃ 1分，72℃ 3分
 最后延伸：72℃ 15分
14. 取10-20μL PCR产物进行琼脂糖电泳电泳检查PCR结果，如果一条清晰的条带，则可以不做后续的第二轮PCR，而直接进行 DNA 测序或TA克隆。
15. 第二轮PCR：如果第一轮PCR没有一条清晰的条，则带从4管PCR产物中各取1μL分别加入到20μL RNase-free水中进行稀释，然后各取1μL分别作为4管第二轮PCR的模板：

成分	用量
第一轮 PCR产物的稀释液	1μl
PCR MagicMix 3.0	25μl
5´RACE引物 C	2.5μl
自备基因专一性引物 C(10μm)	2.5μl
RNase-free 水	补水至50μl
合计	50μl

16. 按下列条件进行 PCR：第 1-30次循环(94℃ 40秒，52-60℃ 1 分，72℃ 3分)，最后延伸：72℃ 15分
17. 取10-20μL第二轮 PCR产物进行琼脂糖电泳，一般都会有一个样品有清晰的条带出现，则可以直接进行DNA测序或TA克隆。


一步法大提质粒DNA提取试剂盒价格关键词：一步法大提质粒DNA提取试剂盒,One-step plasmid DNA large-scale extraction kit,BTN71101


·核糖核酸酶HII
编号：BTN130675
英文名称：RNase HII
规格：250U
核糖核酸酶HII(RNase HII)为核糖核酸内切酶，适用于在双链DNA内部切刻核糖核酸的5´末端，产生5´磷酸和3´羟基末端。RNase HII还可以在冈崎片段的RNA 部分进行多处切割。其反应示意图如下：


产品特点：
➤ 重组酶
➤ 除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A)
➤在cDNA第二链合成时除去mRNA
➤ 无核酸内切酶、核酸外切酶和RNase污染。

产品组成：

成分	规格
RNase HII(5000U/mL)	12.5μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指1×反应体系中，37℃条件下，30分钟产生与切刻100pmol人工合成双链RNA底物相同的荧光信号所需的酶量。该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。


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电解脱*液(甲*(代"酸")法)   500ml
37380-43-1 Amberlite? XAD7HP吸附树脂(20-60目)
13718-26-8 偏钒酸*
Pollak三色染色液   4×50ml|4×100ml
PY02-310  含糖肉汤琼脂培养基  250克  
ARB12023 大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)Elisa分析 Rat β2-glycoprotein 1 antibody iga/g/m,β2-gp1 iga/g/m ELISA KIT
ARB11261 人骨成型蛋白2(BMP-2)Elisa方法检测 Human bone morphogenetic protein 2,bmp-2 ELISA KIT
ARB11962 大鼠B因子(BF)elisa检测 Rat factor b,bf ELISA KIT
动物源性植物饲料基因组DNA提取试剂盒 
DN0301 中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
ARB12465 大鼠促胰液素(secretIn)含量测试 Rat secretin ELISA KIT
F030822 BIOTIN标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*BIOTIN
HC0075 吸头
PY02-408  HC琼脂基础  250克  
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
ARB13163 小鼠载脂蛋白H(Apo-H)elisa检测说明书 Mouse apolipoprotein h,apo-h ELISA KIT
ARB11626 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量测试 Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,gm-csf ELISA KIT
ARB10752 人抑制素B(INHB)ELISA代测服务 
ARB13326 马β内啡肽(β-EP)ELISA检测服务 Equine beta-endorphin,β-ep ELISA KIT
CYB162036 羊抗小鼠IgG(抗血清) 0.5ml

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