动态浊度法内毒素定量试剂盒厂家直销

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百奥莱博专业生产供应动态浊度法内毒素定量试剂盒厂家直销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：动态浊度法内毒素定量试剂盒厂家直销
英文名：Eendotoxin Quantification Kit(Dynamic turbidity method)
规格：1.7×10支
编号：BTN131204
产地：国产|进口
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C 因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成，反应液的吸光度(OD值，浊度)增加，OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之，OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关，启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。本试剂盒的检测限为0.01 EU/mL～10 EU/mL。

储存条件：低温运输，低温运输，4℃避光保存，有效期两年。

自备试剂：细菌内毒素标准品(BTN140405)、无内毒素水(BTN130502)(可从本公司另购)

使用方法：

一、设备准备
除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。
旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。
带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件，例如，微板鲎试仪ELx808及软件TALgent或Gen5。
二、实验操作
1.动态光度测定仪器的设定，以微板鲎试仪ELx808为例：
a)预热仪器，设置温育温度为37ºC。
b)设置模板及程序:设定读板波长为630nm，设定动力学参数：读板120分钟，每30秒读一次。
2.内毒素标准溶液配制：
a)标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5，0.25，0.125，0.0625 EU/mL或10，1，0.1，0.01 EU/mL)。
b)取自备的细菌内毒素标准品1支，用砂轮沿安瓿颈部划痕，开启，加入适量(建议在0.5mL- 1.2mL之间)自备的无内毒素水，置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。
c)将上述内毒素溶液进一步用自备的无内毒素水稀释成所需浓度，每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。(稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟，用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟，放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。)
3. 阴性对照为无内毒素水。
4. 鲎试剂的溶解：按标示量加无内毒素水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器，将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽，并轻轻摇匀。
5.在微板鲎试仪ELx808上操作：
a)取除热原微板，在各孔中分别加入100μl无内毒素水、内毒素标准溶液，或供试品。
b)将微板放置于鲎试仪中，37ºC温育10分钟。
c)温育结束后，用移液器或多道移液器加入100μl鲎试剂(避免产生气泡)，中速振摇10秒混匀，在630nm波长处，每30-60秒读一次，读板120分钟。
三、数据处理
设定启动OD(可以设为0.02，一般可以在0.02到0.04之间)，软件自动给出其启动时间(T)。
建立标准曲线：lgT = b lgC + a，其中T为启动时间，C为内毒素的浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。
当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：
a)标准曲线的浓度点≥4，标准曲线的相关系数r≤-0.980。
b)标准曲线最低点的T值小于阴性对照的T值。
c)供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

注意事项：
1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。
3. 供试品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
4. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验，参见供试品的干扰试验。

供试品的干扰试验：
1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，必须进行干扰试验；
2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变，或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，必须重新进行干扰试验；
3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验。

步骤如下：
1. 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm)，作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度，如采用标准曲线为10，1，0.1，0.01 EU/mL系列时,可以用供试品配制0.1 EU/mL内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。
2. 用供试品溶液配制浓度为λm的内毒素溶液(即含λm内毒素的供试品阳性对照)，测量出该溶液的内毒素浓度，称为Cs；
3. 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度，称为Ct；
4. 计算该试验条件下的回收率R＝(Cs–Ct)/λm×100％；
5. 当R在50％～200％之间，则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用；
6. 当R在50％～200％之外，需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰，每一稀释溶液都重复步骤2-4，直到内毒素的回收率R在50％～200％之间。选择回收率R最接近100％的稀释倍数进行内毒素检测。

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·一步法96孔板单菌落质粒DNA提取试剂盒(真空法)
编号：BTN131199
英文名称：One-step 96-wells plate single colony plasmid DNA Extraction Kit
规格：1次

·DEPC处理水
编号：BTN60604
英文名称：DEPC-Treated Water
规格：250mL
本产品是用0.1%的焦碳酸二乙酯处理12-16小时后再经过高温高压处理得到的水溶液。由于DEPC是一种高效烷化剂，可以通过与蛋白质中的His残基反应而使蛋白质失去活性，所以可以灭活水中十分顽固的RNase。本产品可以广泛用于各种RNA相关实验。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

附录：DEPC灭活RNase的分子机制


·GpC甲基转移酶(M.CviPI)
编号：BTN130653
英文名称：GpC Methyltranferase(M.CviPI)
规格：200U
该GpC甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。

产品特点：
1．阻止限制性内切酶的切割；
2．改变DNA的物理特性；
3．对DNA统一进行[3H]标记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1酶活单位定义为在 20μl反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μg λDNA不被HaeIII限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。

热失活：65℃ 20分钟。

备注：
胞嘧啶残基被甲基化后，可影响DNA的物理特性，如：降低Z-DNA形成的自由能，增加DNA的螺旋程度，改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。


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·蛋白酶K溶液
编号：BTN80911
英文名称：Proteinase K Solution
规格：5mL
本产品是浓度为10mg/mL的蛋白酶K溶液，可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·Levaditi硝酸*(代"银")法螺旋体染色试剂盒
编号：BTN160655
英文名称：Spirochaeta Staining Kit(Levaditi silver nitrate method)
规格：3×50ml
本产品是利用螺旋体具有的嗜银性，在一定条件下螺旋体可从银液中吸附银离子，经还原液处理后，螺旋体内吸附的银离子被还原为黑色的金属银而显色。该染色液主要用于显示梅毒螺旋体，亦可显示钩端螺旋体，但较少显示热回归螺旋体，对肝脏梅毒树胶肿和肝脏钩端螺旋体具有鉴别作用。

螺旋体是一类细长、弯曲呈螺旋状、运动活波的原核细胞型微生物，具有细菌的基本结构，细胞壁有脂多糖和壁酸。螺旋体分为密螺旋体(如梅毒螺旋体)、疏螺旋体(如回归热螺旋体)、钩端螺旋体等。梅毒螺旋体有8～12均匀的螺旋，两端尖直；钩端螺旋体细长，数目较多而且细密，一端或两端弯曲呈钩状，菌体亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋体和钩端螺旋体可用镀银法进行显色，如Levaditi法、Warthin-Starry法。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	2×50ml
溶液B1	25ml
溶液B2	25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃避光保存，其中溶液B1、B2室温避光保存，有效期3个月。

使用方法：(以下步骤仅供参考)
1．临用前，将溶液B1与溶液B2 按照1:1 比例混合成溶液B，即用即配。
2．组织切片厚度1～2mm 为佳，置于10%福尔马林中固定2～4天。
3．流水冲洗过夜。
4．95%乙醇浸泡24h。
5．蒸馏水浸洗并不停摇动，直至组织下沉为止。
6．更换新的蒸馏水浸洗10min。
7．入溶液A，加盖置于37℃恒温箱孵育1 天，更换新的溶液A，继续37℃恒温箱孵育2天。
8．蒸馏水浸洗3次，每次10min。
9．入配制好的溶液B，加盖室温避光孵育2 天。
10．蒸馏水浸洗3次，每次2min。
11．常规脱水透明，浸蜡包埋。
12．切片厚度6～8μm，贴片，烤干。
13．二甲*脱蜡2次，中性树胶封固。

染色结果：

梅毒螺旋体、钩端螺旋体	黑色或棕黑色
背景	淡黄至棕黄色

注意事项：
1．实验所用器皿需用硫*(代"酸")洗液浸泡，洗干净。
2．步骤5、6的洗片步骤很有必要，一定要把组织中的甲醛和乙醇彻底清除，否则易导致组织内银盐的沉淀。
3．某些细菌和真菌菌丝也会被该染液染成黑色，应注意螺线体为螺旋状形态，并加以鉴别。
4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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