EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书

细胞名称    EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书
形态特性    淋巴母细胞样　
生长特性    悬浮生长　
特征特性      该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件    RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法    1:2传代；5-6天一次 　
传代情况    P2
冻存条件    基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测    荧光法（-）　
STR     -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书注意事项： 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞 Mouse
CM-H015人支气管成纤维细胞完全培养基100mL
大鼠条纹神经元(RNs)(1×106)
615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7712 小鼠肾实质细胞完全培养基 100mL
人二倍体细胞;HEL
EM1 Others Human 人 EM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0200RWPE1(人前列腺上皮细胞)5×106cells/瓶×2
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人少突胶质前体细胞cDNAHOPC cDNA
MCF-7细胞，人癌细胞 人肺鳞癌细胞,LTEP-s细胞 滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild
PLAT Others Human 人 tPAβ 人细胞裂解液 (阳性对照)
人输尿管上皮细胞完全培养基   100mL
人实质细胞完全培养基   100mL
人系膜细胞完全培养基   100mL
人膀胱上皮细胞完全培养基   100mL
液体培养基250g用于甲烷菌计数培养
新生牛血清 采集自出生20天内的新生牛 新西兰 16010-159 500ml incubation media 新生牛血清 采集自出生20天内的新生牛 新西兰 16010-159 500ml
泾阳链霉菌 食用 支/瓶
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)平板9cm*用于测定酵母菌总数
LactoseBroth
疱肉牛肉粒  100g  加入疱肉基础，配成疱肉培养基
含225ml7.5%肉汤均质袋  10个/包  用于金黄色葡萄球菌的选择性增菌培养
含100mlBolton肉汤均质袋  10个/包  用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。
马铃薯-蔗糖培养基  250g  用于霉菌增菌培养
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书ITCBroth
乳糖肉汤 Lactose Broth 用于食品中沙门氏菌检验前增菌
蛋黄粉 Egg yolk powder 250克 BR
BLB培养基250g/瓶用于双歧杆菌的分离培养incubationmediaBLB培养基250g/瓶用于双歧杆菌的分离培养
EEM培养基 250g 用于致病性大肠杆菌的增菌培养和肠杆菌的增菌培养
购买EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0911使用说明书注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
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