YPDA Agar Medium

一、酵母培养基种类及用途

1. 一缺培养基/单缺培养基

用于单质粒酵母转化筛选，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化。

2. 二缺培养基/双缺培养基

用于双质粒酵母转化筛选，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化免疫共沉淀，Y187和AH109 酵母交配实验，接合型二倍体筛选。

3. 三缺培养基

用于双质粒酵母转化筛选和报告基因检测，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统报告基因检测 Y187和AH109 酵母交配实验后报告基因分析（His3,Ade2)。

4. 四缺培养基

用于报告基因分析，酵母双杂交系统和酵母三杂交系统报告基因检测、Y187和AH10。

5. 五缺培养基（订制）

用于报告基因分析和表型分析，酵母三杂交系统报告基因检测(His3,Ade2)、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析。

6. 六缺培养基（订制）

用于报告基因分析、表型分析和药物毒理分析，酵母三杂交系统报告基因检测、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析、药物毒理分析。

注意事项：

1. GAL1启动子诱导表达要选用Minimal SD Agar Base Gal/Raf培养基。

2. 在配制酵母缺陷培养基时，培养基会变色，由浅黄到深褐色不等，对酵母的生长不会产生严重影响。

3. Minimal SD Agar Base Gal/Raf培养基高温高压下可能对诱导效果产生抑止，尤其是在做表达调节介导的功能互补实验需特别注意！

二、酵母培养基的配制

（1） Rich Liquid Media (Broth)

1. 取50克的YPD或者YPDA加1升的去离子水中溶解。

2. 调节pH 至6.5。121℃高压灭菌十五分钟。

3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。

（2） Rich Plating Media with Agar

1. 取70克的YPD Agar或者YPDA Agar加1升的去离子水中溶解（琼脂在高压灭菌后才能溶解）。

2. 调节pH 至6.5. 121℃高压灭菌十五分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

（3） Minimal Liquid Media (Broth)

1. 根据下表在1 L去离子水中加入相应量的SD培养基和氨基酸混合物，搅拌溶解。

2. 调节pH 至5.8。121℃高压灭菌十五分钟。

3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

（4） Minimal Plating Media with Agar

1. 根据下表，在1L去离子水中加入相应量的SD培养基和氨基酸混合物，搅拌溶解（琼脂在高温灭菌后溶解）。
2. 调节pH 至5.8。121℃高压灭菌十五分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

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