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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
上海圻明
- 检测范围:
详见说明
- 检测方法:
ELISA法
- 应用:
仅供科研
- 适应物种:
人
- 样本:
血清组织等
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1800.0 |
人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA酶联免疫法定量测定血清、血浆或其它相关生物液体样本中指标含量或指标存在与否。
产品规格:48T/96T
长期大量现货供应,仅供体外科研使用,不得用于临床诊断
【样本类型】血清、血浆、细胞上清
【产品规格】48T/96T
【贮存方法】2-8℃保存。 避免不必要的重复溶解

人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒实验前预备
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线最高浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
4、浓洗涤液:用 580mL 蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
5、底物溶液:请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用,容器中剩余的底物应予丢弃,不要倒回TMB瓶中。
人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒实验注意事项
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到最佳的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
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文献和实验AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
染料同时染色细胞,为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法。 染料: 吖啶橙(AO)膜通透性较高的染料 溴化乙啶(EB) 正常细胞: AO- 绿色荧光强, EB- 染色红色荧光较弱; 凋亡细胞: AO- 绿色荧光强度弱减, EB- 染色红色荧光加强; 坏死细胞: AO- 绿色荧光强度弱或消失, EB- 染色红色荧光强 (EB可诱导AO的淬灭)。
基本原理: 吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小,配成1×10-4 —2×10-4 可用于直接染色活原代细胞和进行荧光显微镜观察,但不持久,用固定染色观察法效果更好。 材料: 1. 盖片单层
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