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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 样本:
血清血浆脑脊液
- 库存:
100
- 适应物种:
羊
- 应用:
Elisa实验
- 检测方法:
酶联免疫
- 检测范围:
定性分析
- 规格:
96T
羊产气荚膜梭菌(CP)ELISA试剂盒检测原理·
试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被产气荚膜梭菌抗体包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中产气荚膜梭菌(CP)的存在与否。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
- 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 阴性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
| 阳性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
| 检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
- 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;
- 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
- 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性
4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性
羊产气荚膜梭菌(CP)ELISA试剂盒试剂盒性能
- 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。
- 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
- 有效期:6个月
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 羊雌二醇 (E2)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗羊 E2( Estradiol ) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 E2与单抗结合,加入生物素化的抗羊
infection 急性感染 Chronic infection 慢性感染 Acyclovir 无环鸟苷 Classical biotype 古典生物型 Adenoviridae 腺病毒科 Clostridium 梭状芽胞杆菌属 Adenovirus 腺病毒 Cl.botulinum 肉毒梭菌 Adhesin 粘附素 Cl.difficile 艰难梭菌 Adsorption 吸附 Cl.perfringens 产气荚膜杆菌 Amantadine 金刚烷胺 Cl.tetani 破伤风梭菌 Amphotericin
%。 -C100的抗原性较弱,在HCV复制中,不能充分暴露宿主的免疫系统。 -特异性和灵敏性较差。 2.1.2 第二代HCV-ELISA试剂盒 -用基因重组的HCV结构蛋白与非结构蛋白抗原包被固相载体。 -抗原组合:核心区(C区)多肽C22 NS区多肽C33 C1003和NS 5-1-1 -增加C22区和C33区后,抗体出现早,有助早期诊断,提高阳性率。有利早期诊断。 -C22是早期易出现病毒血症 2.1.3 第三代HCV-ELISA试剂盒 人工合成多肽抗原,由36个氨基酸组成的Cp
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