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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括Phusion 超保真 PCR Master Mix( 提供 HF 缓冲液 )多少钱在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:Phusion 超保真 PCR Master Mix( 提供 HF 缓冲液 )多少钱
规格:500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
产地:国产|进口
编号:SV0843
概述:
由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA聚合酶对于 PCR 应用至关重要。 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。
其它剂型:
Phusion和Phusion 热启动 Flex DNA聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR试剂盒包含 Phusion聚合酶、Phusion HF和GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO和DNA
Marker。
浓度:
2,000units/ml。
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·糖原合成酶激酶 3(GSK-3)
编号:SV1572
规格:50KU|10KU
概述:
可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用,蛋白*(代"磷")酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长,确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的*基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法,这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。
由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构,这些较短的*基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构,因此把问题简单化了(见综述 1),没有考虑到二级及三级结构,也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素,此外,在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响,因此,使用这些序列时应该慎重。
另一方面,这些共有序列已经被证实是识别的关键序列,简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽,除了能预测磷酸化位点以外,往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
下表列出了 我公司提供的蛋白激酶特异性序列,磷酸基接受位点用红色标出,可以进行功能替换的*基酸用斜杠(/)标出,对识别贡献不大的*基酸用“X”表示。
某些蛋白激酶在它们的识别序列中包括磷酸*基酸残基,被称为“hierarchical”白激酶(见综述 3),如:CKI 和 GSK-3。它们通常需要另一个激酶预先在它们自己的磷酸化位点附近磷酸化,S(P)表示这种预先存在的丝*酸残基。
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文献和实验® DNA聚合酶用量更少,而产量更高。正是这些独特的优点,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。 超保真 ——克隆好帮手 如果你下一步打算克隆,那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。它的错配率极低,是高保真PCR的理想选择。利用改良的lacI方法检测,在HF缓冲液中,该酶的错配率为4x10-7。这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。需要提醒的是,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR
的组分。Taq DNA 聚合酶是用于 PCR 扩增最广为人知的聚合酶,它的发现变革了 PCR 的应用。Taq DNA 聚合酶有相对较高的热稳定性,在95 ℃有约 40 min 的半衰期。其合成速度约 60 s/kb,可扩增约 5 kb 的片段。所以 Taq 酶适用于一般的常规 PCR。如今,新一代的DNA聚合酶经研发可获得更好的PCR性能,如 SuperFi DNA 聚合酶、Phusion 高保真 DNA 聚合酶等。 在 50 μL 体系中,一般 1-2 units 的DNA聚合酶已经足够
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝,请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时,DNA 聚合酶停顿,导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度,准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍,并且具有很高的产率。 Q
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