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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
杂交瘤细胞;S-95-7品牌
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
50
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
上海一研
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
株
| 产品名称 | 生长特性 | 价格 |
| 杂交瘤细胞;S-95-7品牌 | 半贴壁生长 | 来电可享受优惠 |
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
杂交瘤细胞;S-95-7品牌质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
对细胞的真实性,支持客户鉴定STR或者基因突变测序数据,如证明细胞错误,全额退款。
杂交瘤细胞;S-95-7品牌冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
杂交瘤细胞;S-95-7品牌步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
酒酵母 Saccharomyces cerevisiae 人牙周膜成纤维细胞完全培养基
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae 无花果曲霉 Aspergillus ficuum
羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini 厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia
LS 180(人结肠腺细胞) Hs 746T(人胃细胞)
植物杆菌 Lactobacillus plantarum 粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe
根瘤菌 Rhizobium sp. 香菇 Lentinula edodes
大鼠成骨细胞完全培养基 人支气管上皮细胞完全培养基
曲霉属 Aspergillus sp. 人肠静脉内皮细胞完全培养基 20-Hydroxyecdysone (50 mg) Ecdysterone|Isoinokosterone; (5β)-2β,3β,14,20,22R,25-hexahydroxy-cholest-7-en-6-one
Chlorthalidone (25 mg) Hygroton|NSC 69200|Oradil|Thalitone; 2-chloro-5-(2,3-dihydro-1-hydroxy-3-oxo-1H-isoindol-1-yl)-benzenesulfonamide
杂交瘤细胞;S-95-7品牌ONX 0914 (1 mg) PR 957; N-
SU 1498 (5 mg) AG-1498|Tyrphostin SU 1498; (2E)-2-cyano-3-[4-hydroxy-3,5-bis(1-methylethyl)phenyl]-N-(3-phenylpropyl)-2-propenamide
Nullscript (5 mg) N-hydroxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoquinoline-2(3H)-butanamide
Gimeracil 5-Chlorodihydropyrimidine|CDHP|Gimestat; 5-chloro-4-hydroxy-2(1H)-pyridinone
Baricitinib (25 mg) INCB 028050|LY3009104; 1-(ethylsulfonyl)-3-[4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1H-pyrazol-1-yl]-3-azetidineacetonitrile
Ximelagatran Exanta|H 376/95; N-[(1R)-1-cyclohexyl-2-[(2S)-2-[[[[4-[(hydroxyamino)iminomethyl]phenyl]methyl]amino]carbonyl]-1-azetidinyl]-2-oxoethyl]-glycine, ethyl ester
AB-CHMINACA metabolite M7 (500 ug) 2-(1-(cyclohexylmethyl)-1H-indazole-3-carboxamido)-3-methylsuccinic acid 杂交瘤细胞;S-95-7品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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文献和实验PCR试剂 ,20μl反应体系包括: 10μl 2×T品牌定量PCR试剂, 8.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA。每份试剂三管重复。 反应程序:95℃10min,95℃ 15sec,61℃ 31sec,40个循环。实验结果 小鼠肝脏组织RNA经反转录成的cDNA分别用BioTeke公司试剂、A公司试剂和T公司试剂同时进行两步法荧光定量PCR扩增结果如图1。 从两个公司试剂的扩增曲线(图1a)中可以看出
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
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