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星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商

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  • 2025年07月11日
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      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商的品牌:百奥莱博,是优质的病毒PCR检测试剂盒产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多星状病毒荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。


    名称:星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商
    等级:科研试剂
    规格:48次/盒
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口

    欲咨询购买星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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    星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商关键词:百奥莱博,SYA204,星状病毒荧光PCR检测试剂盒

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    星状病毒荧光PCR检测试剂盒厂商关键词:百奥莱博,SYA204,星状病毒荧光PCR检测试剂盒


    ·沙门氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA002
    英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Salmonella
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    一、简介
    沙门氏菌(Salmonella)可引发人类、家畜以及野生禽兽不同形式的疾病。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品,可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。本方法为荧光PCR检测方法,反应在同一管内连续进行,操作简单,并有效防止了污染,能对样品中或预培养液中的沙门氏菌进行快速检测,具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。沙门氏菌的探针报告基团为FAM,淬灭基团为None。

    二、用途
    该试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及食品中沙门氏菌的检测。

    三、试剂盒组成(50T/Kit)
    组份 数量 规格
    沙门氏菌荧光qPCR反应液(Sal-qPCR MIX) 1管 750μL/管
    DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
    阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
    阳性对照(Sal-PTC) 1管 50μL/管

    四、荧光PCR仪器适用范围
    ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

    五、储存条件及有效期:
    本试剂盒于-18℃以下保存,有效期为6个月。

    六、样品采集与DNA提取
    6.1 样品采集
    6.1.1 食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》(GB 4789.4-2010)要求进行。
    6.1.2 粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
    6.1.3 病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
     注:上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。
    6.2 DNA提取(用户可根据需要选择商业化DNA提取试剂盒)
    6.2.1 培养物:取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
    6.2.2 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
    6.2.3 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

    七、检测步骤:
    7.1 试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(Sal-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 15µL N×15µL
    向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Sal-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qPCR反应条件
    将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    1循环 50℃ for 2 min
    预变性 1循环 95℃ for 10 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。

    八、结果分析
    8.1 结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
    8.2 试验成立判定
    (1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
    (2) 阳性对照(Sal-PTC):均产生扩增曲线。
    (3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
    8.3 结果判定
    (1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明Sal核酸阳性。
    (2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Sal核酸阴性。
    (3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
    (4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行Sal qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Sal核酸阳性;否则判为样本阴性。

    九、注意事项:
    (1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    (2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
    (3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
    (4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    (5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。




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