北京现货蜡状芽孢杆菌荧光PCR检测试剂盒销售

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北京现货蜡状芽孢杆菌荧光PCR检测试剂盒销*(代"售")是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，由北京百奥莱博供应，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多蜡状芽孢杆菌荧光PCR检测试剂盒等细菌PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

名称：北京现货蜡状芽孢杆菌荧光PCR检测试剂盒销*(代"售")
编号：SYA135
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂

北京现货蜡状芽孢杆菌荧光PCR检测试剂盒销*(代"售")正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·创伤弧菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA026
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA500
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·RoundupReady®转基因抗除草剂大豆特异性基因单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA278
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·人细小病毒B19核酸检测试剂盒
编号：SYA774
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
人类细小病毒B19是英国科学家Cossart及其同事于1977年在筛查无症状乙肝患者血清时无意发现的，根据生化及分子生物学特点将其归为细小病毒科。由于其是在B组的第19号样品中发现的，故命名为B19病毒。最初人们认为B19是人群中普遍存在而不致病的一种病毒，但后来发现，B19感染是引起传染性红斑、慢性溶血性贫血患者发生再障危象、免疫抑制患者慢性贫血、孕期流产、死胎的病原体。
本试剂盒适用于检测人全血等标本中的人细小病毒(B19)DNA，适用于人细小病毒(B19)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对人细小病毒B19特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对人细小病毒B19核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 2管 1.5ml
酶液 1管 50μl
B19反应液 1管 1.0ml
B19阳性质控品 1管 50μl
阴性质控品 1管 250μl
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融，有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【标本采集】
1. 适用标本类型：人全血；
2. 标本采集：
血液:无菌注射器抽取外周血1-2ml注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管；
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
取抗凝血下层(细胞层)50μl，加入200μl ddH2O使其胀破。
1.2 DNA提取
1) 取上述处理好的标本40μl，加入等体积核酸提取液，100℃恒温处理10分钟，13000 rpm离心5分钟，取上清液转移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2) DNA的提取也可以采用北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法)，请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1
管阴性对照+1管阳性对照)，每测试反应体系配制如下表：
试剂 B19 反应液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加样(样本处理区)
将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μl，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
4.2 推荐循环参数设置：
步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
1 1 cycle 94℃ 2min 否
2 40 cycle 94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
反应体系为25ul；荧光通道检测选择：FAM通道。
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定
1) 设置基线(baseline)：一般情况下，对ABI 7500、7700等仪器设为6-15cycle，对PE5700设为3-15cycle,对MJ Research Option2设为6-12cycle。特殊情况可对基线适当调整。
2) 设置阈值(threshold):以阈值线刚超过阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点。
5.2 结果判断
1) 阳性：检测样本Ct值小于等于35.0，且曲线有明显的指数增长期；
2) 可疑：检测样本Ct值大于35.0且小于40.0，重复一次实验，如果Ct值仍小于40.0，且曲线有明显的指数增长期，为阳性，否则为阴性；
3) 阴性：检测不到样本Ct值或Ct值为40。
6. 对检验结果的解析
实验室环境污染，试剂污染，标本交叉污染会出现假阳性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果。
7. 质控标准
1) 阴性质控品：扩增曲线无对数生长期或无Ct值显示；
2) 阳性质控品：扩增曲线有明显对数生长期，且Ct值≤32;
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用10%次*酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA051
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(竞争法)(注：竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)
编号：SYA651
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·乙脑病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA221
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪伪狂犬(PRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA572
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·EB病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA144
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副溶血性弧菌毒素调控基因(TOXR)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA071
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫病毒(FMDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA401
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
口蹄疫病毒实时荧光qRT-PCR检测操作说明书是按照参照OIE《Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals 2009》国际标准和《中国国家标准口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测方法》(GB22915-2008)而制备的商业化检测试剂盒。试剂盒的探针报告基团为6-FAM，能对样品中口蹄疫病毒进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。

二、用途：
本试剂盒适用于检测发病动物血清、水泡液、淋巴结等标本以及细胞培养液中所有血清型(包括A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲1型)口蹄疫病毒(FMDV)RNA；适用于口蹄疫病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(40T/Kit)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(FMDV-qRT-PCR MIX) 1管 560μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 40μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(FMDV-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
（1） 猪病料：剪取50-100mg猪病料，加入装有500 µl PBS或生理盐水的研钵中缓慢研成匀浆，取匀浆液转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20sec；取上清备用。
（2） 动物血清、水泡液、淋巴结等标本以及细胞培养液：取样本至无RNA酶污染的离心管中备用。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
（1） 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
（2） 每管加入600 µL裂解液，分别加入被检样本200 µL，再加入200 µL*仿，混匀器上振荡混匀5 s，于4℃ 12000 r离心15 min。
（3） 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，加入-20℃预冷400µL异丙醇，吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中，避免吸出中间层，颠倒混匀。
（4） 于4℃ 12000 r离心15 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体；加入600µL 75％预冷乙醇，洗涤。
（5） 于4℃ 12000 r离心10 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体。
（6） 10000 r离心10 s，用微量加样器将其吸干，室温干燥5 min～10 min。
（7） 加入10µL 无核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r离心5 s，冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(FMDV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000r离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(FMDV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(FMDV-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明FMDV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明FMDV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行FMDV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明FMDV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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