抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒

　抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧气化酶反应系统,产生超氧阴离子自由基,加入电子传递物质及显色剂,使反应体系呈现紫红色,可利用分光光度计测其吸光度。当抗超氧阴离子的物质,例如:白细胞,有些抗肿瘤的药物,可增加此反应,使超氧阴离子自由基增加,故比色时颜色变深.依据形成物的颜色深浅计算出抑制或产生超氧阴离子自由基的能力强弱。

抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒产品优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
4、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
5、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
6、再现性好：变异系数CV=1.7%。
7、回收试验： X =99%。
8、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
9、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。

抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒产品图片;
 


所需仪器及自备试剂：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、漩涡混匀器
4、台式离心机
5、微量移液器

样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

操作流程：
1、按步骤加入样本和R1、R2混合试剂，37℃水浴60分钟
2、加入R3、R4，抽提室温静置40分钟，3500～4000转/分，离心10分钟
3、取上清0.5 ml，加入显色剂，静置10分钟，550nm波长，0.5cm光径，比色

抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒技术参数
  

批间CV	批内CV	回收率	最底检出线	检测范围
3.99	2.4	103	0.01mmol/L	0.01-6mmol/L

本试剂盒保存期：3个月，贮存温度：2～8℃，特别提醒R1、R2以及标准品需放在-20℃以下冷冻保存。

发表文章
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植物组织样本的前处理

一、匀浆介质
一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
二、组织匀浆的制备
1、取组织块（0.2g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成20%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成20%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
三、样本保存:
        植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
        制备好的匀浆液建议不要冻存,最好当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指标4℃可存放3～5天(如SOD要存放2～3天,MDA可存放3～5,总蛋白测定可存5～7天等)

抑制与产生超氧阴离子自由基（O2—•）测试盒本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，如有质量问题，本研究所负责包退包换。