金黄色葡萄球菌肠毒素A/B(SEB)双重荧光PCR检测试剂盒

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金黄色葡萄球菌肠毒素A/B(SEB)双重荧光PCR检测试剂盒(SEA)优惠的品牌：百奥莱博，是优质的细菌PCR检测试剂盒产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多金黄色葡萄球菌肠毒素A/B(SEB)双重荧光PCR检测试剂盒(SEA)等细菌PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

名称：金黄色葡萄球菌肠毒素A/B(SEB)双重荧光PCR检测试剂盒(SEA)优惠
规格：48次/盒
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口

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·金黄色葡萄球菌单重荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)
编号：SYA005
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Staphylococcus aureus
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对金黄色葡萄球菌特异性引物，对金黄色葡萄球菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的金黄色葡萄球菌(SA)，用于金黄色葡萄球菌(SA)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
金黄色葡萄球菌PCR反应液(SA-PCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(SA-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-2010)要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(SA-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(SA-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(SA-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明SA核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明SA核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行SA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明SA核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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CV0601 平末端DNA加A试剂盒
3522-50-7 柠檬酸铁
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BL0840 羊抗人C3纯化抗体
过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)   2×10ml|2×20ml
二乙基二硫代*基甲*(代"酸")* Cholesterol 20624-25-3
BL0817 HRP标记羊抗兔IgG抗体
9041-35-4 葡聚糖凝胶G-25 Sephadex G-25 medium
腺苷脱*酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)   100T
肌红蛋白 2,6-Dichloroindophenol 100684-32-0
BTN130840 硫*(代"酸")*溶液,10mM,PCR级 MgSO4 ,PCR Grade
2,2’-联喹*(代"啉")-4,4’-二羧酸* Trans-zeatin Riboside 979-88-4
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F030101 HRP标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*HRP
ARB12310 大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)含量检测 Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,mag ab ELISA KIT
BL1416 "Western blotting(山羊IgG)
内源性链亲和素封闭液   100ml
KP201 Pfu PCR MasterMix
BL0987 Peptone 蛋白胨
壮观/奇霉素溶液(50mg/ml) Spectinomycin 50mg/ml 10ml
BL0831 HRP标记牛血清白蛋白BSA抗体
ARB13802 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)elisa检测 Guinea pig ovalbumin specific igg,ova sigG ELISA KIT
ARB12157 大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)酶联免疫定量检测 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1srⅡ ELISA KIT
SJ0567 Sulfo-NHS N-羟基硫代琥珀酰亚胺
ARB14149 大鼠糖基化终末产物(AGE)Elisa分析 
ARB13935 猪组胺(His)代做ELISA实验 Porcine Histamine,His ELISA KIT
RIPA裂解液(中)   100ml
F030828 BIOTIN标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*BIOTIN
A3308-22 驴血清 100ml|500ml
PLP固定液   500ml
PY02-159  麦芽浸膏汤  250克  
BL1102 40%丙*(代"烯")酰胺(19:1)

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