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大鼠脑卒中(MCAO)脑缺血再灌注模型
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北京永欣康泰科技发展有限公司
大鼠脑卒中(MCAO)脑缺血再灌注模型相关药效实验整体解决方案
一、模型种类:
大、小鼠、脑缺血及再灌注模型
二、大鼠脑卒中(MCAO)脑缺血再灌注模型制备方法:
1、实验动物:SD大鼠 ,雄性,体重:180-200g,周龄:6-7周,动物等级:SPF级
2、实验方法:
大鼠在实验前一天禁食一晚,麻醉后呈仰卧位固定于手术板上,颈部纵行切口约3cm,暴露并钝性游离颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA),于颈总动脉(CCA)近心端打活结暂时阻断血供,颈外动脉(ECA)打双结并在双结中间用显微剪剪开小口穿入线栓,从双结中间离断颈外动脉(ECA),调整线栓方向使之进入颈内动脉(ICA),以颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA)分叉处为参考位置,线栓插入到预设刻度,感到阻力,提示线栓头部已到达大脑中动脉(MCA),打结固定线栓。缺血时间30-90min,将线栓拔出,松掉颈总动脉活结,完成。
实验周期:1-7天。
三、神经功能评分:
以Longa5分法为评分标准
0分 无神经缺损症;
1分 提尾时瘫侧前肢内收不能全伸直;
2分 向瘫侧旋转(如视频所示);
3分 行走时向瘫侧倾倒;
4分 不能行走或昏迷;
结果: 术后24小时进行评分,1-3分为有效模型。4分、0分为无效。
四、TTC染色
1、原理:与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。
2、染色方法:取血后立即从左心室插管,快速灌注生理盐水冲洗2min,断头取脑作TCC染色,将大脑从前往后切成5-7个冠状切片,片厚度约为1.8mm,用1% TTC于37℃染色10min后,用组织固定液固定后应用扫描仪进行扫描。并用分析软件进行分析。

五、超声多普勒血流动力学检测(TCD)
超声经颅多普勒血流分析仪是利用电子技术、数字信号处理技术和图像处理技术,脉冲超声波穿透颅骨的薄弱部位,对颅内脑血管的血流进行检测,还可以采用连续超声波对浅表血管内的血流进行检测,能够定量地评价脑血管和浅表血管的供血状态。

六、给药及评价
1、颅内注射给药
2、大、小鼠行为学检测
3、灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药 眼底静脉丛采血
4、小动物核磁成像
5、脑TTC染色,计算梗死面积
6、灌注取脑
7、病理切片 HE染色、尼氏染色、LFB髓鞘染色
8、病理读片,损伤评级
9、免疫组化、免疫荧光、细胞凋亡(Tunel)
10、相关基因、蛋白分析。WB、QPCR
永欣康泰坚持:
上门取样、客服专人跟进项目进度、随时汇报实验进展、为您有效降低科研成本、缩短实验周期。
<-----扫码关注我们
秉承工匠精神 保持严谨态度、专业技术
拓宽思路和眼界 积极探索新的模型构建方法
不断积累经验 完成客户的每一项托付
一、模型种类:
大、小鼠、脑缺血及再灌注模型
二、大鼠脑卒中(MCAO)脑缺血再灌注模型制备方法:
1、实验动物:SD大鼠 ,雄性,体重:180-200g,周龄:6-7周,动物等级:SPF级
2、实验方法:
大鼠在实验前一天禁食一晚,麻醉后呈仰卧位固定于手术板上,颈部纵行切口约3cm,暴露并钝性游离颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA),于颈总动脉(CCA)近心端打活结暂时阻断血供,颈外动脉(ECA)打双结并在双结中间用显微剪剪开小口穿入线栓,从双结中间离断颈外动脉(ECA),调整线栓方向使之进入颈内动脉(ICA),以颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA)分叉处为参考位置,线栓插入到预设刻度,感到阻力,提示线栓头部已到达大脑中动脉(MCA),打结固定线栓。缺血时间30-90min,将线栓拔出,松掉颈总动脉活结,完成。
实验周期:1-7天。
三、神经功能评分:
以Longa5分法为评分标准
0分 无神经缺损症;
1分 提尾时瘫侧前肢内收不能全伸直;
2分 向瘫侧旋转(如视频所示);
3分 行走时向瘫侧倾倒;
4分 不能行走或昏迷;
结果: 术后24小时进行评分,1-3分为有效模型。4分、0分为无效。
四、TTC染色
1、原理:与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。
2、染色方法:取血后立即从左心室插管,快速灌注生理盐水冲洗2min,断头取脑作TCC染色,将大脑从前往后切成5-7个冠状切片,片厚度约为1.8mm,用1% TTC于37℃染色10min后,用组织固定液固定后应用扫描仪进行扫描。并用分析软件进行分析。

五、超声多普勒血流动力学检测(TCD)
超声经颅多普勒血流分析仪是利用电子技术、数字信号处理技术和图像处理技术,脉冲超声波穿透颅骨的薄弱部位,对颅内脑血管的血流进行检测,还可以采用连续超声波对浅表血管内的血流进行检测,能够定量地评价脑血管和浅表血管的供血状态。

六、给药及评价
1、颅内注射给药
2、大、小鼠行为学检测
3、灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药 眼底静脉丛采血
4、小动物核磁成像
5、脑TTC染色,计算梗死面积
6、灌注取脑
7、病理切片 HE染色、尼氏染色、LFB髓鞘染色
8、病理读片,损伤评级
9、免疫组化、免疫荧光、细胞凋亡(Tunel)
10、相关基因、蛋白分析。WB、QPCR
永欣康泰始终站在您的立场思考,所有动物实验均由多年经验的老师亲自指导操作、每个实验项目均有专人负责,周末无休息,给药全程不间断。保证高成模率、保证实验结果客观可重复,节省您的宝贵时间。
实验室可构建的动物模型 :
注:点击模型名称查看详细信息
检测平台
备注:以上只是常规制备的动物模型种类,如果有其他动物模型制备的需求,也可以按照方案进行定制
实验室可构建的动物模型 :
| 构建动物模型名称 | 适用范围 |
| 1、裸鼠肿瘤(皮下、原位)动物实验 | 胰腺、肝、胃原位接种、皮下接种 |
| 2、兔 腹主动脉、颈动脉硬化(球囊法)模型 | 稳定制备 颈动脉、腹主动脉硬化模型 |
| 3、心肌缺血、大、小鼠、兔、小型猪心电图、心脏超声、病理评价 | 心肌缺血及再灌注、心梗、血压测定(麻醉及清醒状态下)等 |
| 4、Ⅰ、Ⅱ型糖尿病大小鼠、兔动物模型 | 高脂诱导+STZ制备糖尿病模型及糖尿病并发症研究,药效评价 |
| 5、骨质疏松大鼠、小鼠实验(去势) | 老年性骨质疏松相关疾病临床前药效评价 |
| 6、股骨头坏死、骨缺损、鼠、兔模型 | 镇静、镇痛动物模型,行为学模型制作及药物筛选 |
| 7、Apoe小鼠动脉粥样硬化整体实验 | 高脂饲养、取材、病理实验、大体染色等 |
| 8、急性粒细胞白血病动物实验 | |
| 9、肾结石快速成模大鼠模型 | 乙二醇致大鼠肾脏草酸钙结石模型 |
| 10、眼科大小鼠模型、视网膜铺片、 玻璃体腔内注射 |
眼科疾病模型及相关检测方法 |
| 11、脑缺血、帕金森、脑出血动物模型 | 脑病实验、颅内注射、技术成熟稳定 |
| 12、肾脏缺血、肾移植、肾衰动物模型 | 肾脏缺血、肾移植、肾衰竭实验及检测平台 |
检测平台
| 服务项目 | 服务承诺 | 服务周期 | 样本种类 |
| 病理切片、免疫组化 | 染色结果照片 | 2-3周 | 组织 |
| Western blotting | 胶片 | 1-2周 | 蛋白样本或组织 |
| 流式细胞服务 | 散点图、分析数据、设备信息等 | 1-2周 | 血样、骨髓等 |
| 细胞凋亡检测 | 凋亡图、数据分析 | 细胞 | |
| RT-PCR | 扩增图 | 1-2周 | RNA或组织 |
| 血压监测(无创式) | 实时血压数据 | 大、小鼠 |
备注:以上只是常规制备的动物模型种类,如果有其他动物模型制备的需求,也可以按照方案进行定制
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拓宽思路和眼界 积极探索新的模型构建方法
不断积累经验 完成客户的每一项托付
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- 内容
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文献和实验相关实验
讲师介绍: 焦成 武汉华联科生物技术导师,负责动物中心技术带教及模型研发与应用, 累计受理13项实用新型专利,5项发明专利。发表多篇动物实验相关中文核心期刊。
如何提高脑缺血的成功率?经常有朋友费了九牛二虎之力,做了几个大鼠MCAO模型,第二天一看,个个活蹦乱跳,毫无脑缺血症状,当场晕。不成功的主要原因是栓线插入深度不够,即栓线的前端未进入大脑前动脉(ACA),拴线的粗细倒是次要的,0.20~0.26mm均可。因此,保证栓线进入ACA并阻断对侧来的血流,而又不刺破血管是重中之重。(一)制备技巧秘诀1:许多文献报道插入深度为18.5±0.5mm(270g左右大鼠),如果按这一标准去做,而不考虑大鼠的个体差异,后果是缺血的程度参差不齐,很多大鼠会出现症状
本人从事脑缺血的基础研究已有15年的历史,从93年开始研究栓线法大鼠MCAO模型,当时国内几乎还没人做这方面的工作,遇到困难无人可求。 仅烧制栓线这一工作就耗了近6个月的时间,功夫不负有心人,我终于发明了一种制备栓线的设备,可以随心所欲控制光滑末端的大小,非常好用,模型的成功率、更死灶的稳定性得到极大改善。 95年在成都召开的《第四届全国脑血管病会议》上作了大会发言,受到同行的极大关注,同行试用我制备的栓线后,都给与很高的评价。 如此光滑的末端
大鼠脑卒中(MCAO)脑缺血再灌注模型
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