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长期
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Recombinant Human Izumo sperm-egg fusion protein 4
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386
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")JN1165型重组人精子IZUMO4蛋白品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:JN1165型重组人精子IZUMO4蛋白品牌
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
产地:国产|进口
英文名:Recombinant Human Izumo sperm-egg fusion protein 4
编号:JN1165
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的His16-His214在C端带有Fc标签。
IZUMO4质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
IZUMO4制剂:冻干品
IZUMO4保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
IZUMO4复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于IZUMO4:
Izumo sperm-egg fusion protein 4 is a sperm membrane protein which plays a key role in the fusion in the mouse. IZUMO4 has an N-terminal domain with significant homology to the N-terminal domain of Izumo.It belongs to the Izumo family . Izumo 4 is a soluble protein expressed in the testis and in other tissues. Izumo domain possesses the ability to form dimers, whereas the transmembrane domain or the cytoplasmic domain or both of Izumo 1 are required for the formation of multimers of higher order.
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·IgG Fab切割酶II
编号:JN0167
英文名称:FabCutter II Protease
规格:1000U|5000U
本酶是一种新型的Fab"切割酶,通过多步纯化获得。该酶能对人、鼠、绵羊等物种不同亚型的免疫球蛋白IgGs进行快速单位点酶切。增加酶的浓度和延长酶切时间,该酶也可以对小鼠的IgG2a 和 IgG3进行切割。该酶的酶切位点位于免疫球蛋白IgG铰链区的下方,酶切产物为2个F(ab")片段和Fc片段。与木瓜蛋白酶,无花果蛋白酶,胃蛋白酶等相比,FabCutter II Protease具有酶切位点单一,切割快速等优点。
FabCutter II Protease在生理条件下发挥酶切作用,保持抗体的免疫活性。该酶在pH6.0-8.0之间都具有活性(表一),最适酶切温度为37℃,常温下延长酶切时间也可达到同样的酶切效果。
活性定义:在10mM PB,137mM NaCl, 2.7mM KCl, pH 7.4的反应体系内,37℃反应30min,一个单位的酶能将1μg的人源IgG切割95%以上。
应用实例:

One unit cleaves ≥ 95% of 1μg human IgG1 when incubated in 10mM PB,137mM NaCl,2.7mM KCl,pH 7.4 at 37℃ for 30 min as monitored by SDS-PAGE。
1: Human IgG;
2: Human IgG cleaved by FabCutter II protease;
M: Protein Marker。
表一:可供选择的反应缓冲液及pH
| 兼容 Buffers | pH |
| PBS | 6.0-8.0 |
| MES Buffer | 5.5-6.5 |
| HEPES Buffer | 7.0-8.0 |
| Ammonium Bicarbonate Buffer | 6.0-7.0 |
| Sodium Acetate Buffer | 6.0 |
*pH值低于5,会造成酶不可逆失活;pH值高于8.0,需要优化反应条件。
溶解方法:
1、溶解前低速离心,使冻干粉末聚集于管底。
2、用无菌ddH2O溶解,1000U酶加入20μl无菌ddH2O,5000U酶加入100μl无菌ddH2O,配制成酶活性为50U/μl的溶液。
3、低速离心,使溶液汇聚于管底。
操作方法:
1、按照溶解说明将冻干粉溶解,配制成为50U/μl的溶液。
2、待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里,建议浓度为0.5-10mg/ml。
3、按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里。
4、37℃酶切30min,取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。
注:可使用本品中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果,用70μl ddH2O配制成1mg/ml的蛋白溶解,取50μl加入1μl的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。
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文献和实验后,采用HPLC、LC-MC和LC-MC/MC等测定温孵液中原型药物或其代谢产物的浓度,分析其主要代谢途径。 3.1 肝微粒体制备 P450酶主要在肝脏中表达,肝脏中的P450酶在体外是以微粒体的形式存在的。微粒体是指在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡状结构,是异质性的集合体。它包含内质网膜和核糖体两种基本成分,在体外实验中具有蛋白质合成、蛋白质糖基化和脂类合成等内质网的基本功能。目前,制备肝微粒体常用的方法是差速离心法。具体制备流程见下图(图
活性的话,也可能出现高度降解的情况。如重组人基质金属蛋白酶3(MMP-3)被认为有促使哺乳动物上皮细胞凋亡的作用。它在Pp中高度降解,仅当与其组织抑制物TIMP-1共表达时才能保持稳定。这也提醒我们外源基因本身对产物稳定性的影响同样重要。 7、翻译后修饰 一般情况下Pp能产生较酿酒酵母明显要短的高甘露糖型寡糖链,且较均一,长度在8-14个之间,使产物更加稳定,而这正是Pp表达外源蛋白的一个优势。虽然糖基化对某些外源蛋白的活性没有太大影响,它却可能在蛋白折叠和抗蛋白酶降解中起重要作用。然而,糖
如SMD1163、SMD1165或SMD1168亦可避免产物降解的发生。虽然并不是每一种外源蛋白都会受内源性蛋白酶的影响,但在未知其有无降解可能的情况下可以考虑使用此种宿主菌。 在另外一种情况下,如果基因工程产物会影响宿主菌生长代谢活性的话,也可能出现高度降解的情况。如重组人基质金属蛋白酶3(MMP-3)被认为有促使哺乳动物上皮细胞凋亡的作用。它在Pp中高度降解,仅当与其组织抑制物TIMP-1共表达时才能保持稳定。这也提醒我们外源基因本身对产物稳定性的影响同样重要。 8、翻译后修饰 一般情况
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