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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
室温
- 保质期:
长期
- 英文名:
Coomassie Brilliant Blue R250
- 库存:
409
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括考马斯亮蓝R250 蛋白质研究在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:考马斯亮蓝R250 蛋白质研究
英文名:Coomassie Brilliant Blue R250
编号:SY0346
规格:10g
产地:国产|进口
考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue)是两种相似三*甲*(代"烷")染料的总称,有G250和R250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上 “G”为Green 的缩写,因G250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“R”为Red的缩写,因R250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的*基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比*基黑高5倍,可达0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色,才能进行蛋白条带的观察。
考马斯亮蓝G250的检测灵敏度虽然较低,但也可替代R250,使用一种快速而简单的方法进行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0时,溶液无色;pH 7.0时溶液呈深蓝黑色;若发生酸化,溶液呈现透明的棕褐色。当G250与蛋白结合,溶液又回到蓝色,主要因为蛋白分子周围具有更偏中性的pH环境。合适条件下,当把胶放在酸化的G250溶液中染色,显示出蓝色的蛋白条带,背景呈浅琥珀色。此种方法条带快速显色,且背景颜色也很浅使得条带看起来很清楚,则不需要做褪色处理。大部分蛋白用G250检测的下限是0.5µg。虽然灵敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色节省高达11 h。
中文别名:考马斯亮兰R250;酸性蓝83;酸性艳蓝6B;亮蓝R;
英文别名:Brilliant Blue R; Brilliant Indo*(代"c")yanine 6B; C.I. number 42660; Acid Blue 83;
CAS:6104-59-2
分子式:C45H44N3NaO7S2
分子量:825.97
外观:暗红色至深暗红或暗色粉末
溶解性:溶于热水(1 mg/ml),乙醇和甲醇
储存条件:室温
结构式

使用方法
1. 标准染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶置于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液中固定,水平摇床上低速摇动30min~过夜;
2) 去除固定液,更换0.25%考马斯亮蓝R250染色液(0.25% R250 溶于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液)完全覆盖住胶,染色2-4h。直至胶染成均匀的蓝色。注意:当胶在染色液内肉眼不可见时,说明染色完成,否则与深色的染色液对比,凝胶区域看起来颜色偏浅。
3) 将胶重新放置在5%甲醇,7.5%醋酸,87.5%水溶液中脱色4-24h。约1-2h后蛋白条带即可看到,直至背景变透明后脱色才结束。中间可更换2-4次脱色液;
注意:此方法可检测到的蛋白量最低达到0.1µg蛋白/条带。
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
2. 快速染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶在25%IPA,10%醋酸的水溶液中固定30-60min;
2) 将胶放置在10%醋酸的水溶液中进行染色,含有60 µg/ml的考马斯亮蓝R250。约30min后条带显示,让胶继续染色直至达到理想的蛋白条带。在此染色方法中胶的背景染色比较浅,由于使用胶的浓度很低。
3) 将胶重新放在10 %醋酸溶液中脱色2h或更长。期间可更换2-4次脱色液;
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
注意事项
1)0.25%考马斯亮蓝R250染色液配置的过程中,需要先用甲醇溶解R250粉末后,再加入醋酸和水,一般情况下不需要滤纸除杂。溶液可在4度存放6个月,若长时间保存出现沉淀,可用滤纸过滤得到澄清液体。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我公司的考马斯亮蓝R250 蛋白质研究,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体(DYKDDDDK)
编号:SY0649
英文名称:Monoclonal Flag-Tag (DYKDDDDK), Mouse mAb
规格:20μl(>50次)
本品为小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体,小鼠抗Flag标签单克隆抗体。推荐稀释比例:WB(1:5000),IF(1:1000),IP(1:100)。
标签抗原由于其分子量小,对融合蛋白的活性没有影响等特点,已被广泛应用于重组蛋白在后续免疫印迹、免疫沉淀和免疫技术的检测中。Flag标签是重组蛋白研究中应用较为广泛的一种,该标签系统利用一个短的亲水性八*基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白的N-端或者C-端,且该标签可被后续肠激酶去除。
Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。
免疫原:KLH-多肽交联物(DYKDDDDK)
反应性(Reactivity):All
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
考马斯亮蓝R250 蛋白质研究关键词:酸性艳蓝6B,亮蓝R,酸性蓝83,考马斯亮兰R250
·GRE-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0081
英文名称:GRE luciferase reporter plasmid
规格:1μg
GRE报告基因(报告基因质粒)(GRE luciferase reporter plasimd)是用于检测glucocorticoidreceptor转录活性水平为目的的报告基因。GR(glucocorticoidreceptor)调控的糖皮质类固醇是强有力的抗炎介质,并对心血管、新陈代谢、免疫和体内平衡功能进行调节或维持。
GRE报告基因主要应用于糖皮质激素介导的信号途径(glucocorticoid-mediated signaling pathway)的激活水平研究、药物研究以及基因过表达和RNAi表型分析等。
pGMGRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个GR结合位点,可以高灵敏度地检测GR的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得GRE报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMGRE-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
考马斯亮蓝R250 蛋白质研究关键词:酸性艳蓝6B,亮蓝R,酸性蓝83,考马斯亮兰R250
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一、目的 学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。二、原理 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白
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