SY0315型RIPA裂解液(弱)(国产,进口)

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北京百奥莱博专业生产供应SY0315型RIPA裂解液(弱)(国产,进口)，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：SY0315型RIPA裂解液(弱)(国产,进口)
英文名：RIPA lysis buffer (Weak)
编号：SY0315
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

SY0315型RIPA裂解液(弱)(国产,进口)极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·多聚D-赖*酸溶液(5mg/ml)(分子量15万～30万)(细胞培养级)
编号：SY0464
英文名称：Poly-D-lysine Solution (5 mg/ml), Mw 150,000-300,000
规格：2mg（5mg/ml）
本品为无菌的多聚D-赖*酸（Poly-D-lysine）溶液，浓度为5mg/ml，使用时直接稀释到需要浓度即可。本溶液以分子量为150,000-300,000的Poly-D-lysine配制所得。本品用作细胞培养基质，推荐使用量为：对于25cm2的培养板需要0.1mg/ml的聚赖*酸溶液约0.5ml-1.0ml。

多聚赖*酸（poly-lysine）是一种带正电荷的*基酸聚合物，能够结合于DNA，红细胞膜或任何带负电荷蛋白。是一种非特异性的细胞粘附因子，促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面（如细胞培养皿，载玻片等）的静电相互作用。当吸附到培养表面后，多聚赖*酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖*酸分子量的大小与粘度相关，即分子量较低，粘度较低；分子量较高，粘度较高，提供的粘附位点也较多。分子量＞30,000的聚赖*酸适用于促进细胞粘附到固体基质。

多聚赖*酸（poly-lysine）有两种常见亚型，D-和L-型。由于多聚赖*酸是细胞结合的非特异性粘附因子，因此两种亚型都可用作包被固体基质。然而在细胞培养相关应用中，某些细胞会消化多聚-L-赖*酸并吸收，摄入过多的多聚-L-赖*酸会产生一定的细胞毒性。因此，遇到这种情况首选多聚-D-赖*酸（Poly-D-lysine）。

中文别名：多聚-D-赖*酸**酸盐，分子量150,000-300,000
英文别名：Poly-D-lysine hydrobromide, Mw 150,000-300,000; PDL , Mw 150,000-300,000;
CAS：27964-99-4
分子式：D-Lys-(D-Lys)n-D-Lys · xHBr
分子量：150,000-300,000
外观：无色至黄色溶液
储存条件：-20℃，有效期两年
结构式：




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·AP3-GFP报告基因质粒
编号：SY0205
英文名称：AP3 GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
AP3-GFP报告基因是用于检测AP3转录活性水平为目的的报告基因。

AP3-GFP报告基因主要应用于Activator Protein 3信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMAP3-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AP3结合位点，可以高效地检测AP3的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得AP3-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM AP3 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMAP3-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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