北京现货小牛肠碱性磷酸酶特价优惠

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名称：北京现货小牛肠碱性磷酸酶特价优惠
英文名：Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
规格：1000U
产地：国产|进口
编号：SY0388
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶，可以降解几乎所有磷酸单酯，但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase，中文名碱性磷酸酶，可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除，常用于阻止载体的自连作用：在分子克隆实验中，DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团，因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止，提高了目的片段插入率。另外，碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板，以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。

来源：携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵母
质量控制（Quality Control）：无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
热灭活（Thermal Inactivation）：在螯合剂存在下，65℃加热30min，99%活性不可逆丧失；使用*酚，可使酶完全失活。
储存液条件（Storage conditions）：10 mM Tris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
活性定义：在pH9.8, 37℃条件下，以对硝基*(代"*")酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物，1分钟生成1µmol硝基酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。
最佳pH（Optimal pH）：该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH为10，在底物浓度低时，最佳pH为8，此时该酶活性较高浓度底物时稍低。
优化体系（Optimal Buffer）：AP Buffer (500 mM Tris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)
储存条件：-20℃

使用方法:
1 DNA去磷酸化
① 在1.5ml离心管中加入下列试剂：
无菌ddH2O————Up to 50µl
DNA 片段*————1-20pmol
Alkaline Phosphatase————1-2µl
10×AP buffer————5µl
【*】：单链DNA或含5’端突出末端的DNA推荐低温下孵育，平末端DNA或含3’突出末端的DNA建议在较高温度下孵育。
② 混匀上述试剂，于37℃或50℃孵育30min。或者37℃孵育15min后，再于50℃孵育15min。

2 酚*仿法抽提DNA
① *酚/*仿/异戊醇（25:24:1）抽提2次。
【注】：推荐在酚提取前将其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以彻底灭活碱性磷酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min，灭活效果更佳。
② *仿/异戊醇（24:1）抽提。

3 乙醇沉淀DNA
① 加入2.5µl 3M NaCl(终浓度150mM).
② 加入125µl（2.5倍体积）预冷乙醇，混匀后于-20℃放置30-60min，沉淀DNA。

4 溶解DNA
离心，彻底去除乙醇后，将DNA溶于适量去离子水（＜20µl）。

北京现货小牛肠碱性磷酸酶特价优惠极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·ISRE-GFP报告基因质粒
编号：SY0170
英文名称：ISRE GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
ISRE GFP Reporter Plasmid是用于检测STAT1/STAT2转录活性水平为目的的报告基因。STATs是一类重要的核转录因子，共包括STAT1~STAT4，STAT5a，STAT5b及STAT67个成员，它们与细胞增殖、分化和凋亡密切相关，其中STAT1和STAT2参与了细胞的凋亡控制。

ISRE-GFP报告基因主要检测细胞Type I Interferon信号通路中STAT1/STAT2的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMISRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个STAT1/STAT2结合位点，可以高效地检测STAT1/STAT2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ISRE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ISRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMISRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·腔肠素hcp
编号：SY0239
英文名称：Coelenterazine hcp
规格：1×250μg
本品为粉末形式供应的腔肠素hcp（Coelenterazine hcp），是天然腔肠素的衍生物之一。腔肠素hcp-水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍，且量子产量高和Ca2+反应速度快。非常适合用于*离子水平的检测。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：CLZN-hcp
CAS：123437-32-1
分子式：C25H25N3O2
分子量：399.48 g/mol
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
外观：黄色至橘色粉末
纯度：≥95%（TLC）
结构：



注意事项
1）腔肠素hcp粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，可能造成腔肠素hcp氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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ARB11736 人登革热抗体(DF-Ab)酶免分析 Human dengue fever antibody,df ELISA KIT
2×Taq plus MasterMix 500μl|5×500μl
CYB167074 兔抗亲合素
CYB161001 人IgG(冻干粉)
7240-90-6 X-gal 
ARB12102 大鼠甘油三酯(TG)含量分析 Rat triglyceride,tg ELISA KIT
线粒体膜蛋白提取试剂盒   50T|100T
ARB12282 大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)elisa检测说明书 Rat inhibin binding protein,inhbp ELISA KIT
HC0139 血球计数板
Acr-Bis(40%,19:1)   500ml
L-缬*酸甲酯盐*(代"酸")盐 MEGA-10 6306-52-1
ARB13003 小鼠抗单核细胞抗体(AMA)酶免分析 Mouse anti-monocyte antibody,ama ELISA KIT
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·低熔点琼脂糖
编号：SY0252
英文名称：Low Melting Point Agarose
规格：5g
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散(RID)实验。

琼脂糖的基本参数，包括：1)硫*(代"酸")盐含量，琼脂糖的纯度指标；2)凝胶强度，指施加于凝胶使之断裂的外力；3)胶凝点，指水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度；4)电渗(EEO)，一种液体穿透凝胶的一种电动运动，会干扰分离效率。

低熔点琼脂糖(Low melting point agarose)是经过改良使得成胶温度和熔点更低的琼脂糖，相比于常规琼脂糖，分子筛特性更好，条带清晰度更高。非常适用于小分子量核酸的分离以及电泳后核酸片段的回收(因其约在65.5℃熔化，几乎低于所有核酸分子的熔点)。低熔点琼脂糖凝胶电泳纯化回收的DNA胶条重熔后，可以直接用于制备放射性同位素标记的DNA探针。本品在37℃以下保持流动，适用于凝胶内的酶促反应、组织培养、细胞的克隆和病毒空斑实验等。

产品性质

CAS：9012-36-6
外观：白色或浅黄粉末
凝胶强度(1.5%)：>480 g/cm2
胶凝温度(1.5%)：24-30℃
熔胶温度(1.5%)：≤65.5℃
电渗值(EEO, -mr)：≤0.12
硫*(代"酸")盐：≤0.15%
DNA/RNA酶(DNase/ RNase)：不含
蛋白酶(Protease)：不含

储存条件：常温。

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