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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color)
- 库存:
827
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
AEC显色试剂盒红色(IHC)价格的品牌:百奥莱博,是优质的免疫检测产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多AEC显色试剂盒红色(IHC)等免疫检测产品请联系我司咨询订购。
名称:AEC显色试剂盒红色(IHC)价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:SY0762
规格:1kit
英文名:AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color)
AEC(3-amino-9-ethylcarbazole)是3-*基-9-乙基咔唑的简称,在过氧化物酶的催化下,AEC显色工作液会于反应部位产生溶于酒精的红色沉淀,必须在水溶性介质中复染和封片。本试剂盒采用液体性滴瓶包装,使用方便。
产品组份:
20×醋酸盐浓缩缓冲液(含H2O2, pH5.6)————3ml
20×AEC浓缩液————————————————3ml
操作方法
1)在过氧化物酶孵育完成以后,TBS或PBS 充分洗涤,一般5min/次,共4次。
2)向1ml 蒸馏水中滴加1滴20×AEC浓缩液和1滴20×醋酸盐浓缩缓冲液,混匀,加至标本上。一般避光显色10-30min。若无背景出现则可继续显色。直至显色满意为止。
3)蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时用甲基蓝3-5min或不含酒精的苏木素(Mayer’s)复染。
4)水溶性封片剂封片,显微镜观察。
储存条件:-20℃,有效期一年。
关于AEC显色试剂盒红色(IHC)价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·BL21 (DE3)化学感受态细胞
编号:SY0014
英文名称:BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
规格:100μl×10管
本品是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主,其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测,本品无外源质粒DNA残留,转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
组份:
BL21 (DE3)化学感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl
注意事项
1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
2)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
4)为确保最高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
储存:-80℃。
AEC显色试剂盒红色(IHC)价格关键词:AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color),AEC显色试剂盒红色(IHC),SY0762
·36mm透析袋(透析分子量14kDa)
编号:SY0416
英文名称:Dialysis Tube MD44 (Mw14,000)
规格:1卷(5米)
透析袋通常为半透膜制成的袋状,以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换,透析的主要原理是:透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外,直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析。
本透析袋参数:扁平宽度为44mm,直径36mm,截留分子量14kDa。
储存条件:4℃,有效期2年。
注意事项
1)每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,具体长度需根据待透析的样品而定。
2)在大体积(eg.500mL)的2%(W/V)的碳酸**和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3)用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4)放在大体积(eg.500mL)的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5)冷却后,存放于4℃,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。【注】:从此时起取用透析袋必须戴手套。
6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7)使用时,一端由透析夹夹紧,另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液。
【注】:
① 通常要留1/3~1/2的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大或样品含盐量较高时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大,如大烧杯等。
AEC显色试剂盒红色(IHC)价格关键词:AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color),AEC显色试剂盒红色(IHC),SY0762
·RNase抑制剂(鼠源)
编号:SY0266
英文名称:Murine RNase inhibitor(40U/μl)
规格:2KU
RNase抑制剂(RNase inhibitor)是人的胎盘中存在的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活。该产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种RNase (RNase A, B, C),此外经过RT-PCR、RT-qPCR检验,本品能与Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱*酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加适合于对高DTT敏感性实验 (如qPCR)。
该产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统。
活性定义:抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。RNase A 的活性通过水解Cyclic 2, 3-CMP 生成3-CMP定量求得。
质量控制:
核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μl体系中,加入200 U本品,以ddH2O为模板,扩增E. coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
储存条件:-20℃,有效期2年。
应用实例
1.在RNase free离心管中配制如下混合液:
| RNase free ddH2O | to 20μl |
| 5×Buffer | 4μl |
| Oligo (dT)18 (50 μM) | 1μl |
| dNTP Mix (10 mM each) | 1μl |
| RNase Inhibitor (40 U/μl) | 1μl |
| Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 1μl |
| 模板RNA | 10 pg-2.5 μg |
2.轻轻混匀。
3.50℃ 45min, 70℃ 15 min。
4.产物于-20℃保存。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抑制RNase活性的pH值范围较广,在 pH 7~8时表现最大活性。
3)起泡或剧烈搅拌 (Vortex等)会引起失活。
4)不抑制RNase H活性。
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文献和实验将AEC溶于DMF中,再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前,加入30%H2O2。切片显色时间为5~20min。 该显色液作用后,阳性部分呈深红色,加以苏木精或亮绿等作为背景染色,则效果更佳。由于终产物溶于酒精和水,故需用甘油封固。 4.TMB显色液 试剂:TMB HCl 亚硝基铁氰化钾 无水酒精 配制方法: (1)醋酸盐缓冲液:取1.0mol/L的HCl 190ml加入1.0mol/L的醋酸钠400ml中混合,再加蒸馏水稀释至1000ml,用醋酸或NaOH将pH调至3.3。 (2)A液
素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号,但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法,利用聚合物与二抗结合,形成聚合物-二抗复合物,实现信号放大,该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中,针对 HRP(辣根过氧化物酶)显色系统,其常用底物为DAB/AEC(HRP/DAB 呈棕褐色染色,具有很好的光稳定性,HRP/AEC 呈红色染色,在阳光下会褪色,不易保存。 基础 IHC
型试剂无需稀释。 10.显色 显色是免疫组化染色的最后关键步骤,一般过氧化物酶的检测系统选用DAB或AEC显色。前者显色为棕色,后者为红色。要得到最佳的显色效果,必须在镜下严格控制,以检出物达到最强显色效果而背景五色为终止点。根据经验,DAB在配制后最长放置时间是30分钟以内,过时则不能使用,DAB滴加到组织切片时作用时间最长不宜超过10分钟(最好在5分钟内),否则不管有无阳性结果均应终止反应。对一些富含内源性酶的组织用DAB显色时极易出现背景色,应尽早在镜下控制,以达到
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