北京SY0049型通用型动物组织PCR试剂盒促销

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北京百奥莱博供应的北京SY0049型通用型动物组织PCR试剂盒促销用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多通用型动物组织PCR试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：北京SY0049型通用型动物组织PCR试剂盒促销
品牌：百奥莱博
编号：SY0049
英文名：Animal Tissue Direct PCR Kit
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分：

 

组分	50T	200T	储存
2×Tissue MasterMix*	500 μl	1 ml×2	-20℃
Buffer AL	5 ml	20 ml	室温或4℃
Protease	220 μl	880 μl	4℃
6×DNA Loading Buffer	1.5ml	1.5ml	4℃

注：2×Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTP（dUTP替代了dTTP）、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

保存方法
① 本试剂盒的2×Tissue Master Mix保存在-20℃，避免反复冻融。
② Buffer AL在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。
③ Protease溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

注意事项
1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。
2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。
3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。
7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。
2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。
3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。
4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。
【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。
6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。
【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间最佳，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。
7. PCR反应体系配制*
按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O	Up to 20μl
2×Tissue Master Mix	10μl
正向引物（10μM）	0.5μl
反向引物（10μM）	0.5μl
模板 DNA	xμl

【*】：① 配制的PCR反应体系可根据所需终体系（如50μl）按照该比例进行调整。
② 通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。
8. PCR反应条件设置
此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化最佳的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。

循环步骤	温度	时间	循环数
UNG酶处理	50℃	5min	1
灭活UNG酶&预变性	94℃	5min	1
变性	94℃	10sec	30-40循环
退火a	50-65℃	20sec
延伸b	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5min	1

【注】：a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置；
b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定，对于1kb以内的DNA片段，建议延长时间为30秒。

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·溶壁酶(10U/μl)
编号：SY0003
英文名称：Lyticase (10U/μl)
规格：1500U
溶壁酶（Lyticase）是真菌细胞溶解酶的简称，普遍用于需要水解酵母细胞壁的下游实验，包括基因组研究，酵母人工染色体（YACs）提取，酵母转化，原生质体制备，酵母细胞破碎，工业生产，酵母失活等。本品为溶液型的溶壁酶，浓度为10U/μl，常用的工作浓度是0.15U/μl。一般根据具体的实验应用，酵母类型和细胞量来优化最佳的工作浓度。对于酵母基因组DNA/质粒DNA提取，可以按照试剂盒内的浓度来工作。
储存条件：-20 ℃。

·细胞消化液
编号：SY0534
英文名称：Lyticase (10U/μl)
规格：100ml
本品为即用型的无菌产品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5mM EDTA和3mg/L酚红），比活力≥200 u/ml，可直接用于细胞培养相关实验。

本品是包含有蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的完美替换产品，用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞。适用于组织解离和细胞分离，因分离后的细胞能保持完好的表面抗原，且不含任何动物动物或者细菌来源组分，可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。与传统的胰酶消化液相比，本品具有以下优势：
1）适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化，以及昆虫细胞；
2）温和有效的消化干细胞（hESCs和mESCs），冻存后细胞具更高复苏率；
3）几分钟内实现粘附细胞的分离，不需清洗或中和反应，节省细胞传代时间；
4）对细胞消化较为温和，能增加细胞产量和存活率，增强细胞贴壁效率，改善细胞形态和细胞生长特性等。

储存条件：-20℃，有效期两年


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·30%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺，19:1
编号：SY0342
英文名称：30% Acryl/Bis Solution, 19:1
规格：500ml
Acr-Bis常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺（N，N’-methylene bisacrylamide，简称Bis ）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度（交叉连接的程度）所决定。

聚合链的长度与丙*(代"烯")酰胺的浓度有关，交联度由Acr 与Bis的相对比例决定，调节单体丙*(代"烯")酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低，凝胶的孔径愈大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度愈高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。

30% Acr-Bis(19:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
30% Acr-Bis(37.5:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。

储存条件：4℃,避光。

·支原体去除试剂(2000×)
编号：SY0548
英文名称：Treatment (2000×)-Mycoplasma Elimination Reagent
规格：1ml
在细胞培养过程中，支原体污染常有发生，但由于其特殊性很难被肉眼和显微设备检测到，因此做好支原体的预防工作显得尤为重要。可通过向培养基中添加支原体预防试剂，来有效预防支原体的污染。

由于支原体无细胞壁，传统的抗生素一般对其无效，而本产品结合了常用的对支原体具有抑菌作用的抗生素，经优化配比制备成混合制剂，其核心成分是喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗生素。本产品在支原体去除试剂的基础上，对三种抗生素的浓度进行了进一步优化，确保在抑制支原体生长的同时，不会对细胞造成伤害。本品为2000×母液，使用时需稀释至1×工作液浓度，具体使用方法与细胞培养过程中添加双抗的方法一致。

储存条件：-20℃避光，保质期18个月

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