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北京低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)促

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      Low Molecμlar Weight Protein Marker II

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      860

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


    名称:北京低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)促销
    编号:RFT048
    规格:20T(100μl)
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    英文名:Low Molecμlar Weight Protein Marker II
    本产品包含7种已知分子量的标准蛋白质组成,分子量范围为14.4kD-116kD,可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本成品由于含有SDS,不适于非变性胶蛋白电泳(Native PAGE)。



    使用说明:
    1、第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
    2、-20℃取一管样品,彻底融化,95℃处理5分钟后立即上样。
    注:
    a.一次热处理后,未用尽样品-20℃保存;下次使用时只要室温完全融化混匀后即可上样,可以不用再加热处理。然而,如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿,可在Marker中加入终浓度为50mM的DTT,95℃处理5分钟后再上样。
    b.上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
    3、电泳结束后,染色,观察结果。
    注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量。

    储存条件:-20℃。

    北京低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)促销外,我公司正在打折促销以下产品:

    ·细菌基因组DNA提取试剂盒
    编号:RFT037
    英文名称:Bacterial genomic DNA Extraction Kit
    规格:50次|100次
    本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取细菌(革兰氏阳性菌和阴性菌)的基因组DNA。溶菌酶能有效去除细菌细胞壁;蛋白酶K能把核酸解离出来; RNaseA能去除痕量的RNA污染;离心吸附柱能够高效、专一吸附DNA,最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物,提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

    试剂盒组成:

     
    组份 50次 100次 贮存方式
    缓冲液GA 15 ml 30 ml 室温
    缓冲液GB 15 ml 30 ml 室温
    去蛋白液GD(浓缩液) 18 ml 36ml 室温
    漂洗液GW(浓缩液) 25 ml 25 ml 室温
    洗脱缓冲液EB 15 ml 15ml 室温
    蛋白酶K(20mg/ml) 1 ml 2×1 ml -20℃
    溶菌酶(5mg/ml) 1ml 2×1 ml -20℃
    RNase A(10mg/ml) 1ml 1 ml -20℃
    吸附柱CG 50个 100个 室温
    收集管(2 ml) 50个 100个 室温
    说明书 1份 1份  


    准备工作:
    1、准备55℃和70℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
    2、按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液GW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
    3、每次使用前请检查缓冲液GA,缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

    操作步骤:
    如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

    1、取细菌培养液1–2 ml,10,000 g离心1分钟,尽量吸净上清;向细菌沉淀中加入180μl EB,旋涡混匀后加入18μl 溶菌酶,室温放置10-15分钟,期间间歇混匀几次。
    注:溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关,用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。
    2、10000g离心1分钟,吸弃大部分上清,留下约10μl液体,彻底混匀。
    注:由于余留的液体较少,彻底混匀菌体不太容易,用手指弹动管壁附加枪头反复吹打既能完全混匀菌体。混匀一定要彻底,否则容易导致步骤8中离心柱堵塞。
    3、向菌体沉淀中加入200μl缓冲液GA,混匀。
    4、向管中加入20μl 蛋白酶K,混匀,55℃处理15-30分钟,期间间歇混匀2-3次至溶液清亮。
    注:加入蛋白酶K后会产生絮状物,消化彻底的标志是絮状物完全消失,溶液变清亮。如消化不彻底,会导致步骤8中离心柱堵塞。
    5、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液,混匀后室温放置2分钟。
    6、加入220μl缓冲液GB,混匀,70℃放置10-30分钟(对于革兰氏阳性菌,时间应延长到60分钟)。
    注:加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置相应时间后溶液会变清亮。如溶液未变清亮,应延长70℃处理时间。如果絮状物不能处理干净,容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
    7、加入220μl无水乙醇,充分混匀。
    注:加入乙醇后会产生絮状沉淀,可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理,容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
    8、将上一步所得溶液和絮状沉淀加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),11000g离心5分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
    注:如果出现吸附柱堵塞现象,可将离心时间延长到10分钟。
    9、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11,000 g离心2分钟,倒掉废液,吸附柱放入收集管中。
    10、向吸附柱CG中加入700μl漂洗液GW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11,000 g离心60秒,倒掉废液,吸附柱放入收集管中。
    11、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液GW,11,000 g离心60秒,倒掉废液。
    12、吸附柱CG放回收集管中,11,000 g离心2分钟。
    注:此步骤非常重要,其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
    13、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,11,000 g离心2分钟。
    注意:
    a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl,体积过小影响回收效率。
    b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
    14、DNA产物-20℃保存。

    DNA浓度及纯度检测:
    基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。

    储存条件:室温,有效期12个月。


    北京低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)促销关键词:RFT048,Low Molecμlar Weight Protein Marker II,低分子量蛋白Marker II,14.4~116KD,低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)

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    ·2×GC Buffer
    编号:RFT091
    规格:1ml|5×1ml|10×1ml
    本品用于PCR扩增复杂结构的DNA片段。本品能与各种PCR酶配合使用,能够扩增具有复杂二级结构模板(GC rich、重复序列等)的PCR片段。使用 GC Buffer 进行PCR扩增时,建议使用 Tm 值较高的引物。因此,引物最好设计在30 mer左右。使用GC Buffer扩增的GC rich 的DNA片段长度,会因GC含量不同而各有差异。由于GC Buffer和一般的PCR Buffer相比DNA变性效果较强,因此,一般的 DNA片段(GC含量低于50%的目的片段)不推荐使用2×GC buffer进行扩增。

    储存条件:-20℃

    ·EB染色液
    编号:RFT152
    英文名称:EB staining solution
    规格:10ml
    本品是EB的水溶液,浓度为10mg/ml。EB(*化乙锭)能与核酸分子特异结合,用于观察琼脂糖或聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。*化乙锭(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量为394.32)含有一个可以嵌入DNA 碱基的三环平面基团。它与DNA 的结合没有碱基序列特异性。大约每2.5 个碱基插入一个*化乙锭分子。当染料分子插入后,紫外激发后呈现荧光,可以检测到10ng 的DNA 条带。

    使用方法:
    使用前,先离心快甩EB溶液至管底,以防开盖后EB造成的污染。

    琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(预染法):
    1. 按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
    2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,加入10 mg/ml EB溶液至终浓度为0.5μg/ml (如100ml凝胶加入EB量为5μl);彻底摇匀后铺胶并插入梳子。
    3. 凝固后,将梳子轻轻拔出。
    4. 上样电泳,电泳结束后紫外观察。

    琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(后染法):
    1. 按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
    2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,不要加入EB溶液,直接铺胶并插入梳子。
    3. 凝固后,将梳子轻轻拔出。
    4. 上样电泳。
    5. 电泳结束后将凝胶浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 缓冲液中加入150-200μl EB溶液,混匀)染色15-20分钟;TAE或TBE缓冲液中脱色10-15分钟。
    6. 紫外观察结果。

    储存条件:室温避光。



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