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北京百奥莱博科技有限公司
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北京百奥莱博专业生产供应北京66KD蛋白Marker哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京66KD蛋白Marker哪里卖
产地:国产|进口
规格:50mg
编号:RFT041
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质,分子量大小为66kD,可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。
使用方法:
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液:取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液
| 配制量 | 浓度 | 66KD母液(10mg/ml) | 超纯水 | 5×DualColor蛋白上样缓冲液 |
| 10μl | 0.2 μg/μl | 0.2μl | 7.8μl | 2μl |
| 50μl | 0.2 μg/μl | 1μl | 39μl | 10μl |
| 100μl | 0.2 μg/μl | 2μl | 78μl | 20μl |
3、取配制好的溶液彻底混匀后,95℃处理5分钟立即上样电泳,每次上样10μl。
4、电泳结束后,染色,观察结果。
储存条件:-20℃。
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北京66KD蛋白Marker哪里卖关键词:RFT041,66KD蛋白Marker,百奥莱博
·小分子蛋白电泳试剂盒
编号:RFT078
英文名称:Small molecule protein electrophoresis Kit
规格:10次
本试剂盒含有小分子蛋白电泳(多肽电泳)全*(代"套")试剂,可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。
试剂盒特点:
1 适用范围广:2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS,适用于多肽的变性和非变性电泳。
2 分辨率高:凝胶缓冲液独特配方,可以有效分离1-5kD多肽。
3 稳定性高:凝胶缓冲液pH为中性,存放时间长。
4 使用方便:配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液,加上APS和TEMED即可配制凝胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 贮存 |
| 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 | 15 ml | 4℃ |
| 2×多肽电泳分离胶缓冲液 | 30 ml | 4℃ |
| 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 | 15 ml | 4℃ |
| 2×PAA溶液 超低分离胶用 | 30 ml | 4℃ |
| 10% APS(干粉) | 5 ml | 常温 |
| TEMED | 0.5 ml | 常温 |
| 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) | 500 ml(干粉) | 常温 |
| 2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| QuickLan蛋白染色液 | 500 ml | 常温 |
使用方法:
一、10% APS配制:
10% APS配制-5 ml:将APS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10% APS。
二、制胶:
I 配制分离胶
1、按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
表一:(一块1 mm mini胶用量)*
| 分离胶 | 浓缩胶 | |
| 18%T /5 ml | 5%T /2 ml | |
| 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 | / | 1 ml |
| 2×多肽电泳分离胶缓冲液 | 2.5 ml | / |
| 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 | / | 1 ml |
| 2×PAA溶液 超低分离胶用 | 2.5 ml | / |
| 10%APS | 45-60μl** | 20-30μl |
| TEMED | 5μl | 2μl |
注:
* 如非必须,不要使用厚度1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。
表二:超低凝胶制备凝固时间表
| 环境温度 | 20℃ | |
| 分离胶配制 | 浓缩胶配制 | |
| 分离胶配制量 | 5 ml | - |
| 浓缩胶配制量 | - | 2 ml |
| 10%APS | 50μl | 20μl |
| TEMED | 5μl | 2μl |
| 凝固时间 | 5-10 分钟 | 20-30 分钟 |
2、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层,使凝胶表面保持平整。
3、静置5-10分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1、按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
2、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3、静置20-30分钟待凝胶聚合
三. 电泳:
10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制:
将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No:CB010P)置于一干净的一升烧杯中,加入500ml超纯水,彻底搅拌混匀,不要调节pH,即配成500ml的10×TTS缓冲液。
表三:1×TTS缓冲液配制
| 1×TTS配制量 500 ml | 1×TTS配制量 1000 ml | |
| 10×TTS | 50ml | 100ml |
| 超纯水 | 450 ml | 900 ml |
注:伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。
将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液,轻柔拔出梳子,用1ml移液器将梳孔吹洗干净,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,稳压电泳(表四),至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。
表四 多肽电泳条件
| 恒电压 | 150V |
| 起始电流 | 60-75mA/板胶 |
| 结束电流 | 15-25mA/板胶 |
| 电泳时间 | 2.5-3小时 |
四、染色(使用组分9-QuickLan蛋白染色液):
用前必读:
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
使用方法:
1、将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),条带1-2分钟即可见。
2、摇床上常温摇动10-15分钟。
3、观察结果。
注意事项:
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm和1mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2、常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
3、本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
4、本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。
储存条件:4℃,有效期一年。
北京66KD蛋白Marker哪里卖关键词:RFT041,66KD蛋白Marker,百奥莱博
·*苄青霉素溶液(100mg/ml)
编号:RFT174
英文名称:Ampicillin solution
规格:5×1ml
*苄青霉素是一种β-内酰胺类抗生素,干扰肽聚糖的交联从而抑制细菌细胞壁的合成,属于*基青霉素类。*苄青霉素时常被用于分子生物学实验研究中,如用于配制含*苄青霉素的LB培养基或LB平板等。*苄青霉素溶液由*苄青霉素溶于水组成,经0.22μm过滤除菌,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为50~100μg/ml,其中严紧型质粒常采用20μg/ml,松弛型质粒常采用60μg/ml。
使用方法:
根据实验具体要求操作,一般Amp在LB中终浓度为50~100μg/ml。可以按照1/1000 LB体积加入100mg/ml Amp溶液,如100ml LB中加入100μl Amp 100mg/ml。
注意事项:
1、尽注意无菌操作,避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期6个月
·青链霉素溶液(100×)
编号:RFT181
英文名称:Penicillin-Streptomycin Solution
规格:100ml
青霉素-链霉素溶液(100×)是专门用于细胞培养的双抗,经过过滤除菌,可以直接添加到细胞培养液内。一个包装即100ml青霉素-链霉素溶液(100×)可以配制10L细胞培养液。
青霉素-链霉素溶液(100×)中,青霉素的含量为10KU/ml,链霉素的含量为10mg/ml。该溶液用0.85%*化*配制。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml,即按照100倍稀释使用即可。
使用方法:
1、在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100X),比如按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X),混匀即可使用。
2、配制细胞培养液时加入青霉素-链霉素溶液(100X),然后再过滤除菌。配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X),配制完成后过滤除菌即可使用。
储存条件:-20℃。
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