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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Bind-Silane
- 库存:
99
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
25ml
注意事项:
若需重复使用长玻璃板,可用1M的NaOH浸泡过夜,然后用大量清水冲洗。
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文献和实验及试剂 1.电泳仪,垂直电泳槽及其附件,玻璃板,常用实验器材等。 2.玻璃板处理试剂: (1) KOH/甲醇溶液:5gKOH溶于100ml甲醇中,用于清洗玻璃板。 (2) 95%乙醇 (3) 亲和硅烷溶液:95%乙醇 4ml 冰乙酸 20ul 亲和硅烷 20ul (4) 玻璃硅烷:用移液器取适量于短板上,用无尘擦拭纸涂抹均匀。 2.丙烯酰胺溶液45% 丙烯酰胺:43.4克
,7 mol/L 尿素,2% ( W/V ) DTT,4% ( W/V ) CHAPS,2% IPG 缓冲液,pH 3~10 NL,少量溴酚蓝。 ( 10 ) 矿物油。 ( 11 ) 乙醇。 ( 12 ) 冰醋酸 ( 13 ) 亲和硅烷和剥离硅烷。 ( 14 ) 亲和硅烷工作液:8 ml 乙醇,200 μl 冰醋酸,1.8 ml Mlli-Q 超纯水,10 μl 亲和硅烷。 ( 15 ) 40% 丙烯酰胺储液(40% 丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺 37
; (2)用1~5V/cm的电压,待溴芬蓝和二甲苯氰FF迁移到适当距离后停止电泳; (3)在紫外检测仪下检测扩增产物,记录电泳结果并照相。 2.7 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 2.7.1 测序凝胶板的制备 玻璃板的处理:银染测序的玻璃板一定要非常清洁。实验过程中,先用温水和去污剂洗涤,再用去离子水冲洗玻璃板,除去残留的去污剂,最后用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高。每次铺胶前均需分别严格处理长玻璃板和短玻璃板。 (1)长玻璃板的处理 a) 用浸透亲和硅烷溶液
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