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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
山羊IgG(H+L)
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
生物素
- 适应物种:
山羊
- 保质期:
二年
- 抗原来源:
山羊
- 目录编号:
WE0389
- 级别:
多克隆
- 库存:
993
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
兔
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
IgG(H+L)
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Goat IgG, Biotin Conjugated
- 抗体名:
生物素化兔抗山羊IgG(H+L)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")生物素化兔抗山羊IgG(H+L) 生物素化抗体,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:生物素化兔抗山羊IgG(H+L) 生物素化抗体
产地:国产|进口
英文名:Rabbit Anti-Goat IgG, Biotin Conjugated
规格:100μl
编号:WE0389
本产品为生物素标记的经亲和纯化的兔抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA、免疫组化、免疫荧光和流式细胞分析检测。
生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin,SA)具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用,将检测信号级联放大,最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:无
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:
WB(1:1000-20000)
ELISA(1:2000-50000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:100-500)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1:100-500)
Flow cytometry(1:100-500)
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·哺乳动物蛋白抽提试剂盒
编号:WE0262
英文名称:Mammalian Protein Extraction Kit
规格:25次|100次
本试剂盒能够快速,温和,高效的裂解哺乳动物细胞,有效提取细胞浆和细胞核蛋白。该试剂使用温和配方保证所提取蛋白保持生物学活性并可应用于多种蛋白分析试验,如:报告基因和酶活性测定,免疫检测,蛋白纯化等。提取后蛋白可采用BCA法进行蛋白定量分析。哺乳动物蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Mammalian Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品可有效裂解细胞培养板培养的贴壁细胞(无需刮取)以及离心收集的悬浮细胞,较反复冻融或超声法具有更高提取效率。但对于组织蛋白的抽提,建议使用组织蛋白抽提试剂盒(WE0260)。
2、表1中所列的是贴壁细胞蛋白提取的最佳使用量,先收集细胞可以减少试剂用量从而获得更高的蛋白浓度。
3、也可以根据细胞数量估计抽提试剂的使用量。如2×106个Hela细胞约重20 mg,需要加入200μl抽提试剂。
4、通过本产品提取的蛋白,可通过BCA法进行蛋白定量分析。
使用方法:
贴壁细胞蛋白抽提
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、小心倾去贴壁细胞的培养液,使用PBS漂洗细胞。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent(抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),在冰上用枪头吹打贴壁细胞,将裂解液转移至离心管中,冰上孵育20分钟,让细胞充分裂解(试剂使用量请参考附表1,冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、14000×g离心5-10分钟。
5、转移上清液至新管中,用于进一步分析。
悬浮细胞蛋白提取
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、将悬浮细胞2,500×g,离心10分钟,弃去上清。使用PBS漂洗细胞。2,500×g,离心10分钟,弃去上清。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent,抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
4、每100 mg细胞加入至少1ml 1×工作液。如提取的样本量较大,可首先使用少量1×工作液重悬细胞,然后加入剩余工作液。
5、吹打均匀后,冰上放置20分钟,让细胞充分裂解(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
6、14000×g离心15分钟。
7、转移上清至新管中,进行下一步分析。
附表1. 抽提试剂使用量推荐表
| 细胞培养板类型或平皿类型 | 抽提试剂使用量 |
| 100mm | 500-1000μl |
| 60mm | 250-500μl |
| 6孔培养板 | 200-400μl/孔 |
| 24孔培养板 | 100-200μl/孔 |
| 96孔培养板 | 50-100μl/孔 |
附表2. 常见问题及解决办法
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 低提取率 | 低蛋白表达量 | 优化转染系统 |
| 试剂使用量不够 | 增加抽提试剂使用量 | |
| 试剂无法溶解细胞膜 | 增加裂解时间或者加大晃动幅度 | |
| 无法获得膜蛋白 | 更适合提取核浆蛋白 | 使用真核细胞膜蛋白抽提试剂盒 |
储存条件:-20℃
我公司生产供应销*(代"售")的生物素化抗体正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购生物素化兔抗山羊IgG(H+L) 生物素化抗体。
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文献和实验本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0 双蒸水(注意去除游离氨基),用以配制碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液 DMSO(二甲亚砜,有毒试剂) 1 mol/L NH4Cl 叠氮钠(有毒试剂) PBS
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 l NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) l 0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0(见附录) l 双蒸水(注意去除游离氨基),用以配制碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液 l DMSO(二甲亚砜,有毒试剂) l 1 mol/L NH
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类,即 IgG、IgA、IgM、IgD 和 IgE。与免疫测定有关的 Ig 主要为 IgG 和 IgM。Ig 由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig 的轻链是相同的,有 κ(kappa)和 λ(Lambda)两种型别。五类 Ig 的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG 和 IgM 的重链分别称为 γ(gamma)链和 μ(mu )链。 重链和轻链的 N 端的氨基酸排列顺序
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